microfluidic-co-culture-epithelial-cells-bacteria-for-investigating

Microfluidic Co-culture of Epithelial Cells and Bacteria for Investigating Soluble Signal-mediated Interactions

The human gastrointestinal (GI) tract is a unique environment in which intestinal epithelial cells and non-pathogenic (commensal) bacteria coexist. It has ...

During infection in the gastrointestinal tract, enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157:H7 is exposed to a wide range of signaling molecules, including the eukaryotic hormones epinephrine and norepinephrine, and bacterial signal molecules such as indole. Since these signaling molecules have been shown to be involved in the regulation of phenotypes such as motility and virulence that are crucial for EHEC infections, we hypothesized that these molecules also govern the initial recognition of the large intestine environment and attachment to the host cell surface. Here, we report that, compared to indole, epinephrine and norepinephrine exert divergent effects on EHEC chemotaxis, motility, biofilm formation, gene expression, and colonization of HeLa cells. Using a novel two-fluorophore chemotaxis assay, it was found that EHEC is attracted to epinephrine and norepinephrine while it is repelled by indole. In addition, epinephrine and norepinephrine also increased EHEC motility and biofilm formation while indole attenuated these phenotypes. DNA microarray analysis of surface-associated EHEC indicated that epinephrine/norepinephrine up-regulated the expression of genes involved in surface colonization and virulence while exposure to indole decreased their expression. The gene expression data also suggested that autoinducer 2 uptake was repressed upon exposure to epinephrine/norepinephrine but not indole. In vitro adherence experiments confirmed that epinephrine and norepinephrine increased attachment to epithelial cells while indole decreased adherence. Taken together, these results suggest that epinephrine and norepinephrine increase EHEC infection while indole attenuates the process.

Differential effects of epinephrine, norepinephrine, and indole on Escherichia coli O157:H7 chemotaxis, colonization, and gene expression.

Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157: H7 ist w&auml;hrend der Infektion im Magen-Darm-Trakt eine Vielzahl von Molek&uuml;len wie der eukaryotischen Hormone Adrenalin und Noradrenalin und bakterielle Signalmolek&uuml;le wie Indol Signalisierung ausgesetzt. Da diese signalisierende Molek&uuml;le erwiesen haben, die Regulierung der Ph&auml;notypen wie Motilit&auml;t und Virulenz beteiligt, die ausschlaggebend f&uuml;r EHEC-Infektionen sind, vermutet wir, dass diese Molek&uuml;le auch die Ersterfassung der Dickdarm Umwelt und Anlage an der Zelloberfl&auml;che Host regieren. Hier berichten wir, dass im Vergleich zu Indol, Epinephrin und Norepinephrin &uuml;ben unterschiedliche Auswirkungen auf EHEC Chemotaxis, Motilit&auml;t, Biofilm-Bildung, Genexpression und Kolonisierung von HeLa-Zellen. Mit einem neuartigen zwei-Fluorophor Chemotaxis Assay, ergab, dass EHEC Epinephrin und Norepinephrin angezogen wird, w&auml;hrend es von Indol abgesto&szlig;en wird. Dar&uuml;ber hinaus erh&ouml;ht Epinephrin und Norepinephrin auch EHEC Motilit&auml;t und Biofilm Formation w&auml;hrend Indol diese Ph&auml;notypen abgeschw&auml;cht. DNA Microarray Analyse der Oberfl&auml;che-assoziierten EHEC erkennen, dass das Adrenalin/Noradrenalin oben-geregelt die Expression von Genen beteiligt Oberfl&auml;che Kolonisation und Virulenz w&auml;hrend Exposition gegen&uuml;ber Indol ihren Ausdruck sank. Die Gen-Ausdruck-Daten auch vorgeschlagen, dass die Autoinducer 2-Aufnahme bei Gef&auml;hrdung durch Adrenalin/Noradrenalin aber nicht Indol unterdr&uuml;ckt wurde. Einhaltung der in-vitro-Experimente best&auml;tigt, dass Adrenalin und Noradrenalin um Verbundenheit mit Epithelzellen, w&auml;hrend das Indol Einhaltung sank. Zusammen genommen zufolge diesen Ergebnissen Epinephrin und Norepinephrin EHEC Infektion erh&ouml;hen, w&auml;hrend Indol den Prozess d&auml;mpft.

Wirkungen von Adrenalin, Noradrenalin und Indol auf Escherichia coli O157: H7, Chemotaxis, Kolonisation und Gen Ausdruck.

A high incidence of dental disease has been reported in Nepal. Previous studies, both in the Manipal Teaching Hospital, Pokhara, Nepal, and other centers revealed problems in the use of medicines in dentistry. A number of initiatives to improve prescribing have been carried out. The study presented here was undertaken to assess the impact of these initiatives on drug utilization among dental outpatients. The study was conducted among patients attending the dental outpatient department of the hospital over a six-month period. Demographic details were studied. The drug classes and individual drugs prescribed were recorded. The cost of drugs was calculateS using the outpatient pharmacy price list. The prescriptions were analyzed using the WHO/INRUD prescribing indicators. Anomalies were noted in prescribing. Improvement was noted in certain parameters compared to previous studies. The educational initiatives should be strengthened. Managerial interventions can be considered. Further studies are required.

Drug utilization pattern in dental outpatients in tertiary care teaching hospital in western Nepal.

Eine hohe Inzidenz von Zahnerkrankungen wurde in Nepal berichtet. Fr&uuml;here Studien, sowohl in der Manipal Teaching Hospital, Pokhara, Nepal, und anderen Zentren offenbart Probleme bei der Verwendung von Medikamenten in der Zahnmedizin. Eine Reihe von Initiativen zur Verbesserung der Verschreibung wurden durchgef&uuml;hrt. Die hier vorgestellte Studie wurde zur Bewertung der Auswirkungen dieser Initiativen zur Droge Auslastung unter dental ambulant durchgef&uuml;hrt. Die Studie wurde bei Patienten, die Teilnahme an der zahn&auml;rztlichen Poliklinik des Krankenhauses &uuml;ber einen Zeitraum von sechs Monaten durchgef&uuml;hrt. Demografische Informationen wurden untersucht. Die Droge Klassen und individuelle Medikamente wurden aufgezeichnet. Die Kosten f&uuml;r Medikamente wurde berechnet unter Verwendung der ambulanten Apotheke-Preisliste. Die Rezepte wurden analysiert mit die WHO / INRUD Verschreibung von Indikatoren. Anomalien wurden bei Verschreibung festgestellt. Verbesserung wurde bei bestimmten Parametern, die im Vergleich zu fr&uuml;heren Studien festgestellt. Die Bildungsinitiativen sollte gest&auml;rkt werden. Leitende Interventionen k&ouml;nnen betrachtet werden. Weitere Studien sind erforderlich.

Droge Auslastung Muster in dental ambulant in Terti&auml;r-Lehrkrankenhaus in westliche Nepal.

We have shown that the quorum-sensing signals acylhomoserine lactones, autoinducer-2 (AI-2) and indole influence the biofilm formation of Escherichia coli. Here, we investigate how the environment, that is, temperature, affects indole and AI-2 signaling in E. coli. We show in biofilms that indole addition leads to more extensive differential gene expression at 30 degrees C (186 genes) than at 37 degrees C (59 genes), that indole reduces biofilm formation (without affecting growth) more significantly at 25 and 30 degrees C than at 37 degrees C and that the effect is associated with the quorum-sensing protein SdiA. The addition of indole at 30 degrees C compared to 37 degrees C most significantly repressed genes involved in uridine monophosphate (UMP) biosynthesis (carAB, pyrLBI, pyrC, pyrD, pyrF and upp) and uracil transport (uraA). These uracil-related genes are also repressed at 30 degrees C by SdiA, which confirms SdiA is involved in indole signaling. Also, compared to 37 degrees C, indole more significantly decreased flagella-related qseB, flhD and fliA promoter activity, enhanced antibiotic resistance and inhibited cell division at 30 degrees C. In contrast to indole and SdiA, the addition of (S)-4,5-dihydroxy-2,3-pentanedione (the AI-2 precursor) leads to more extensive differential gene expression at 37 degrees C (63 genes) than at 30 degrees C (11 genes), and, rather than repressing UMP synthesis genes, AI-2 induces them at 37 degrees C (but not at 30 degrees C). Also, the addition of AI-2 induces the transcription of virulence genes in enterohemorrhagic E. coli O157:H7 at 37 degrees C but not at 30 degrees C. Hence, cell signals cause diverse responses at different temperatures, and indole- and AI-2-based signaling are intertwined.

Indole cell signaling occurs primarily at low temperatures in Escherichia coli.

Wir haben gezeigt, dass die Quorum-sensing-Signale Acylhomoserine Lactone, Autoinducer-2 (AI-2) und Indol beeinflussen die Biofilm-Bildung von Escherichia coli. Hier untersuchen wir, wie die Umwelt, d. h. Temperatur, Indol und AI-2 signalisieren in E. Coli auswirkt. Wir zeigen in Biofilmen, dass Indol-Zusatz zu umfangreicher differenzielle Genexpression bei 30 Grad C (186-Gen) f&uuml;hrt bei 37 Grad C (59-Gen), das Indol Biofilm-Bildung vermindert also (ohne Wachstum) deutlich st&auml;rker bei 25 und 30 Grad C als bei 37 Grad C und die Wirkung der Quorum-sensing Protein SdiA zugeordnet ist. Der Zusatz von Indol bei 30 Grad C im Vergleich zu 37 Grad C erheblich unterdr&uuml;ckt Gene Uridin Monophosphat (UMP) Biosynthese (CarAB, PyrLBI, PyrC, PyrD, PyrF und Upp) und Uracil-Transport (UraA) beteiligt. Diese Uracil-bezogenen Gene sind auch bei 30 Grad C von SdiA, unterdr&uuml;ckt, die best&auml;tigt, dass Indol Signalisierung SdiA beteiligt ist. Auch im Vergleich zu 37 Grad C, Indol deutlich st&auml;rker gesunken Flagellen-bezogene QseB, FlhD und FliA-Promotor-Aktivit&auml;t, verbessert Antibiotikaresistenz und gehemmt Zellteilung bei 30 Grad C. Im Gegensatz zu Indol und SdiA, der Zusatz von (S) - 4,5 - Dihydroxy-2,3-Pentanedione (AI-2-Vorl&auml;ufer) f&uuml;hrt zu umfangreicher differenzielle Genexpression bei 37 Grad C (63-Gen) als bei 30 Grad C (11-Gen) und, statt zu unterdr&uuml;cken die UMP-Synthese-Gene, AI-2 induziert sie bei 37 Grad C (aber nicht bei 30 Grad C). Auch der Zusatz von AI-2 induziert die Transkription von Virulenzgene in Enterohemorrhagic E. Coli O157: H7 bei 37 Grad C, aber nicht bei 30 Grad C. also Zelle Signale verursachen unterschiedliche Reaktionen bei unterschiedlichen Temperaturen und Indol und AI-2-basierte Signalisierung sind miteinander verflochten.

Indol Zelle Signalisierung tritt vor allem bei niedrigen Temperaturen in Escherichia coli.

It has been proposed that the gastrointestinal tract environment containing high levels of neuroendocrine hormones is important for gut-derived Pseudomonas aeruginosa infections. In this study, we report that the hormone norepinephrine increases P. aeruginosa PA14 growth, virulence factor production, invasion of HCT-8 epithelial cells, and swimming motility in a concentration-dependent manner. Transcriptome analysis of P. aeruginosa exposed to 500 microM, but not 50 microM, norepinephrine for 7 h showed that genes involved in the regulation of the virulence determinants pyocyanin, elastase, and the Pseudomonas quinolone signal (PQS, 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone) were upregulated. The production of rhamnolipids, which are also important in P. aeruginosa infections, was not significantly altered in suspension cultures upon exposure to 500 microM norepinephrine but decreased on semisolid surfaces. Swarming motility, a phenotype that is directly influenced by rhamnolipids, was also decreased upon 500 microM norepinephrine exposure. The increase in the transcriptional activation of lasR but not that of rhlR and the increase in the levels of PQS suggest that the effects of norepinephrine are mediated primarily through the las quorum-sensing pathway. Together, our data strongly suggest that norepinephrine can play an important role in gut-derived infections by increasing the pathogenicity of P. aeruginosa PA14.

The neuroendocrine hormone norepinephrine increases Pseudomonas aeruginosa PA14 virulence through the las quorum-sensing pathway.

Es wurde vorgeschlagen, dass die Magen-Darm-Trakt-Umgebung mit hohen gehalten an neuroendokrine Hormone f&uuml;r Darm-abgeleitet von Pseudomonas Aeruginosa-Infektionen wichtig. In dieser Studie berichten wir, dass das Hormon Noradrenalin p. Aeruginosa PA14 Wachstum, Virulenz Faktor Produktion, Invasion der HCT-8 Epithelzellen und Schwimmen Motilit&auml;t Konzentration-abh&auml;ngigen Weise erh&ouml;ht. Transkriptom-Analyse von p. Aeruginosa ausgesetzt 500 MicroM, aber nicht 50 MicroM Noradrenalin f&uuml;r 7H zeigte, dass Genen, die in der Verordnung die Virulenz Determinanten Pyocyanin, Elastase und Pseudomonas Quinolone Signal (PQS, 2-heptyl-3-hydroxy-4-quinolone) herraufreguliert. Die Produktion von Rhamnolipids, die auch bei p. Aeruginosa-Infektionen wichtig sind, war nicht signifikant ge&auml;ndert Suspensionskulturen nach Exposition gegen&uuml;ber 500 MicroM Noradrenalin doch sank auf halbfeste Oberfl&auml;chen. Ausschw&auml;rmen Motilit&auml;t, einem Ph&auml;notyp, die direkt von Rhamnolipids, beeinflusst ist wurde auch auf 500 MicroM Noradrenalin Belichtung verringert. Die Erh&ouml;hung in der transcriptional Aktivierung LasR aber nicht, dass der RhlR und in den Ebenen der PQS legen nahe, dass die Wirkung von Noradrenalin vermittelt werden, vor allem durch die Las Quorum-sensing Weg. Unsere Daten empfehle zusammen, dass Noradrenalin eine wichtige Rolle im Darm abgeleitete Infektionen spielen kann, durch die Erh&ouml;hung der Pathogenit&auml;t von p. Aeruginosa PA14.

Die neuroendokrine Hormon Noradrenalin erh&ouml;ht Pseudomonas Aeruginosa PA14 Virulenz durch die Las Quorum-sensing Weg.

The human gastrointestinal (GI) tract is a unique environment in which intestinal epithelial cells and non-pathogenic (commensal) bacteria co-exist. This equilibrium is perturbed by the entry of pathogens into the GI tract. A key step in the infection process is the navigation of the pathogen through the commensal bacterial layer to attach to epithelial cells. It has been proposed that the microenvironment that the pathogen encounters in the commensal layer plays a significant role in determining the extent of attachment and colonization. Current culture methods for investigating pathogen colonization are not well suited for investigating this hypothesis as they do not enable co-culture of bacteria and epithelial cells in a manner that mimics the GI tract microenvironment. Here we report the development of a microfluidic co-culture model that enables independent culture of eukaryotic cells and bacteria, and testing the effect of the commensal microenvironment on pathogen colonization. A pneumatically-actuated system was developed to form reversible islands that allow development of bacterial biofilm along with culture of an epithelial cell monolayer. The co-culture model used to develop a commensal Escherichia coli biofilm among HeLa cells, followed by introduction of enterohemorrhagic E. coli (EHEC) into the commensal island, in a sequence that mimics the sequence of events in GI tract infection. Using wild-type E. coli and a tnaA mutant (lacks the signal indole) as the commensal bacteria, we demonstrate that the commensal biofilm microenvironment is a key determinant of EHEC infectivity and virulence. Our model has the potential to be used in fundamental studies investigating the effect of GI tract signals on EHEC virulence as well as for screening of different probiotic strains for modulating pathogen infectivity in the GI tract.

Co-culture of epithelial cells and bacteria for investigating host-pathogen interactions.

Die menschlichen Gastrointestinaltrakt (GI) ist eine einzigartige Umgebung, die in der intestinalen Epithelzellen und nicht-pathogenen (Kommensale) Bakterien nebeneinander existieren. Dieses Gleichgewicht wird durch den Eintrag von Krankheitserregern in der GI-Trakt umwerfen. Ein wichtiger Schritt im Prozess Infektion ist die Navigation des Erregers &uuml;ber die Kommensale bakterielle Schicht Epithelzellen beimessen. Es wurde vorgeschlagen, dass die Untersuchungsverfahren, die den Erreger in der Kommensale Ebene findet eine bedeutende Rolle bei der Festsetzung des Umfangs der Anlage und Kolonisierung spielt. Aktuelle Kultur-Methoden zur Untersuchung der Erreger Kolonisation eignen sich nicht gut f&uuml;r diese Hypothese zu untersuchen, da sie nicht aktivieren Kokulturen von Bakterien und Epithelzellen in einer Weise, die die GI-Trakt Mikromilieu imitiert. Hier berichten wir &uuml;ber die Entwicklung eines mikrofluidische Kokulturen-Modells, das unabh&auml;ngige Kultur aus eukaryotischen Zellen und Bakterien und testen die Wirkung der Kommensale Mikromilieu auf Erreger Kolonisation erm&ouml;glicht. Eine pneumatisch bet&auml;tigte System entwickelte Form reversibel Inseln, die Entwicklung der bakteriellen Biofilm zusammen mit der Kultur der eine Monolage Epithelialer Zellen zu erm&ouml;glichen. Kokulturen Modell zur Entwicklung eines Kommensale Escherichia-coli-Biofilms unter HeLa-Zellen, gefolgt von Einf&uuml;hrung der Enterohemorrhagic E. coli (EHEC) in der Kommensale Insel, in einer Sequenz, die die Abfolge der Ereignisse im GI-Trakt-Infektion nachahmt. Mit Wildtyp E. Coli und TnaA Mutanten (fehlt das Signal Indol) als Kommensale Bakterien, zeigen wir, dass die Kommensale Biofilm Mikromilieu ein entscheidender Faktor f&uuml;r EHEC-Infektiosit&auml;t und Virulenz. Unser Modell hat das Potenzial, in grundlegenden Studien untersuchen die Wirkung von GI-Trakt Signale auf EHEC Virulenz ebenso wie f&uuml;r Screening von verschiedenen probiotischen St&auml;mme f&uuml;r modulierenden Pathogen Infektiosit&auml;t in GI-Trakt verwendet werden.

Kokulturen von Epithelzellen und Bakterien f&uuml;r die Untersuchung von Host-Pathogen Interaktionen.

AI-2 is an autoinducer made by many bacteria. LsrB binds AI-2 in the periplasm, and Tsr is the l-serine chemoreceptor. We show that AI-2 strongly attracts Escherichia coli. Both LsrB and Tsr are necessary for sensing AI-2, but AI-2 uptake is not, suggesting that LsrB and Tsr interact directly in the periplasm.

Chemotaxis to the quorum-sensing signal AI-2 requires the Tsr chemoreceptor and the periplasmic LsrB AI-2-binding protein.

AI-2 ist ein Autoinducer von vielen Bakterien gemacht. LsrB bindet AI-2 in der Periplasm und Tsr ist die l-Serin-Chemorezeptor. Wir zeigen, dass AI-2 Escherichia coli stark anzieht. LsrB und Tsr sind notwendig zur Erfassung von AI-2, aber AI-2 Aufnahme ist nicht, was darauf hindeutet, dass LsrB und Tsr direkt in die Periplasm interagieren.

Chemotaxis auf das Quorum sensing Signal AI-2 erfordert die Tsr-Chemorezeptor und der periplasmatischen LsrB AI-2-verbindliches Protein.

Sie m&uuml;ssen f&uuml;r die Nutzung von Biofilmen f&uuml;r chemischen Umwandlungen in Bioraffinerien gesteuert und ersetzt werden. Zuvor, engineered wir die globale Aufsichtsbeh&ouml;rden Hha und zyklische Diguanylate-Bindung BdcA Proteine zu erstellen, die Biofilm Zerstreuung zu aktivieren. Hier berichten wir eine Biofilm-Schaltung, die diese zwei Zerstreuung Proteine zusammen mit einer Bev&ouml;lkerung-gesteuerte Quorum-sensing-Switch verwendet. Mit dieser synthetischen Schaltung, in einem Roman mikrofluidische Ger&auml;t wir bilden eine erste Kolonisator Biofilm, eine zweite Zelltyp (Dispergatoren) in diese vorhandenen Biofilm einf&uuml;hren, eine robuste Dual-Arten-Biofilm zu bilden und verdr&auml;ngen die erste Kolonisator-Zellen in der Biofilm mit eine extrazellul&auml;re Signal aus den Zellen Disperser. Wir entfernen auch Disperser Biofilms einen chemisch induzierte Schalter und die konsortiale Bev&ouml;lkerung konnte zu optimieren. Daher haben zum ersten Mal Zellen entwickelt worden, die sind in der Lage, eine vorhandene Biofilm zu verdr&auml;ngen und dann entfernt werden, auf Befehl erlaubt konsortialen Biofilm Formation f&uuml;r verschiedene Anwendungen zu steuern.

Synthetische Quorum-sensing-Schaltung konsortialen Biofilm-Entstehung und Ausbreitung in einem Microfluidic-Ger&auml;t zu steuern.

To utilize biofilms for chemical transformations in biorefineries they need to be controlled and replaced. Previously, we engineered the global regulator Hha and cyclic diguanylate-binding BdcA to create proteins that enable biofilm dispersal. Here we report a biofilm circuit that utilizes these two dispersal proteins along with a population-driven quorum-sensing switch. With this synthetic circuit, in a novel microfluidic device, we form an initial colonizer biofilm, introduce a second cell type (dispersers) into this existing biofilm, form a robust dual-species biofilm and displace the initial colonizer cells in the biofilm with an extracellular signal from the disperser cells. We also remove the disperser biofilm with a chemically induced switch, and the consortial population could tune. Therefore, for the first time, cells have been engineered that are able to displace an existing biofilm and then be removed on command allowing one to control consortial biofilm formation for various applications.

Synthetic quorum-sensing circuit to control consortial biofilm formation and dispersal in a microfluidic device.

Bacteria are almost always found in ecological niches as matrix-encased, surface-associated, multi-species communities known as biofilms. It is well established that soluble chemical signals produced by the bacteria influence the organization and structure of the biofilm; therefore, there is significant interest in understanding how different chemical signals are coordinately utilized for community development. Conventional methods for investigating biofilm formation such as macro-scale flow cells are low-throughput, require large volumes, and do not allow spatial and temporal control of biofilm community formation. Here, we describe the development of a PDMS-based two-layer microfluidic flow cell (Î¼FC) device for investigating bacterial biofilm formation and organization in response to different concentrations of soluble signals. The Î¼FC device contains eight separate microchambers for cultivating biofilms exposed to eight different concentrations of signals through a single diffusive mixing-based concentration gradient generator. The presence of pneumatic valves and a separate cell seeding port that is independent from gradient-mixing channels offers complete isolation of the biofilm microchamber from the gradient mixer, and also performs well under continuous, batch or semi-batch conditions. We demonstrate the utility of the Î¼FC by studying the effect of different concentrations of indole-like biofilm signals (7-hydroxyindole and isatin), either individually or in combination, on biofilm development of pathogenic E. coli. This model can be used for developing a fundamental understanding of events leading to bacterial attachment to surfaces that are important in infections and chemicals that influence the biofilm formation or inhibition.

A microfluidic device for high throughput bacterial biofilm studies.

Bakterien sind fast immer als Matrix-ummantelt, Oberfl&auml;che-assoziierte, arten&uuml;bergreifenden Gemeinschaften bekannt als Biofilme in &ouml;kologische Nischen gefunden. Es steht fest, dass l&ouml;sliche chemische Signale, die von den Bakterien erzeugten die Organisation und Struktur des Biofilms zu beeinflussen; Daher gibt es erhebliche Interesse verstehen, wie verschiedene chemische Signale sind f&uuml;r Gemeindeentwicklung coordinately genutzt. Herk&ouml;mmliche Methoden zur Untersuchung von Biofilm-Bildung wie Makro-Ma&szlig;stab-Durchflusszellen sind niedrig-Durchsatz und erfordern gro&szlig;e Mengen erlauben keine r&auml;umliche und zeitliche Steuerung der Biofilm-Gemeinschaft-Formation. Hier beschreiben wir die Entwicklung von ein PDMS-basierte zweilagigen mikrofluidische flie&szlig;en Zelle (&mu;FC) Ger&auml;t zur Untersuchung der bakteriellen Biofilm-Bildung und Organisation an verschiedenen Konzentrationen an l&ouml;slichen Signale. Das &mu;FC-Ger&auml;t enth&auml;lt acht separate Microchambers f&uuml;r den Anbau von Biofilmen acht verschiedene Konzentrationen der Signale &uuml;ber einen einzigen diffusiven mischen-basierte Konzentrationsgradienten Generator ausgesetzt. Das Vorhandensein von Pneumatikventile und eine separate Zelle Aussaat Port ein, der unabh&auml;ngig vom Farbverlauf-mischen-Kan&auml;le bietet vollst&auml;ndigen Isolierung der Biofilm-Microchamber von den Farbverlauf Mixer und auch gut unter kontinuierlicher, Batch oder Semi-batch Bedingungen f&uuml;hrt. Wir demonstrieren die N&uuml;tzlichkeit der &mu;FC durch das Studium der Wirkung von verschiedenen Konzentrationen von Indol-wie Biofilm-Signalen (7-Hydroxyindole und Isatin), einzeln oder in Kombination, Biofilm-Entwicklung von pathogenen E. Coli. Dieses Modell kann verwendet werden, f&uuml;r die Entwicklung eines grundlegenden Verst&auml;ndnis der Vorg&auml;nge um bakterielle Bindung an Fl&auml;chen, die sind wichtig, Infektionen und Chemikalien, die die Biofilm-Bildung oder Hemmung beeinflussen.

Article	Year
Differential effects of epinephrine, norepinephrine, and indole on Escherichia coli O157:H7 chemotaxis, colonization, and gene expression. Infection and immunity\| PubMed ID: 17591798	2007
Drug utilization pattern in dental outpatients in tertiary care teaching hospital in western Nepal. The New York state dental journal\| PubMed ID: 18402382	2008
Indole cell signaling occurs primarily at low temperatures in Escherichia coli. The ISME journal\| PubMed ID: 18528414	2008
The neuroendocrine hormone norepinephrine increases Pseudomonas aeruginosa PA14 virulence through the las quorum-sensing pathway. Applied microbiology and biotechnology\| PubMed ID: 19517106	2009
Co-culture of epithelial cells and bacteria for investigating host-pathogen interactions. Lab on a chip\| PubMed ID: 20024049	2010
Chemotaxis to the quorum-sensing signal AI-2 requires the Tsr chemoreceptor and the periplasmic LsrB AI-2-binding protein. Journal of bacteriology\| PubMed ID: 21097621	2011
Synthetic quorum-sensing circuit to control consortial biofilm formation and dispersal in a microfluidic device. Nature communications\| PubMed ID: 22215088	2012
A microfluidic device for high throughput bacterial biofilm studies. Lab on a chip\| PubMed ID: 22318368	2012

Manjunath Hegde

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications