Eukaryotic Polyribosome Profile Analysis

Protein synthesis is a complex cellular process that is regulated at many levels. For example, global translation can be inhibited at the initiation phase ...

Eukaryotic translation elongation factor 1A (eEF1A) both shuttles aminoacyl-tRNA (aa-tRNA) to the ribosome and binds and bundles actin. A single domain of eEF1A is proposed to bind actin, aa-tRNA and the guanine nucleotide exchange factor eEF1Balpha. We show that eEF1Balpha has the ability to disrupt eEF1A-induced actin organization. Mutational analysis of eEF1Balpha F163, which binds in this domain, demonstrates effects on growth, eEF1A binding, nucleotide exchange activity, and cell morphology. These phenotypes can be partially restored by an intragenic W130A mutation. Furthermore, the combination of F163A with the lethal K205A mutation restores viability by drastically reducing eEF1Balpha affinity for eEF1A. This also results in a consistent increase in actin bundling and partially corrected morphology. The consequences of the overlapping functions in this eEF1A domain and its unique differences from the bacterial homologs provide a novel function for eEF1Balpha to balance the dual roles in actin bundling and protein synthesis.

Coordination of eukaryotic translation elongation factor 1A (eEF1A) function in actin organization and translation elongation by the guanine nucleotide exchange factor eEF1Balpha.

Eukaryotic &Uuml;bersetzung Dehnung Faktor 1A (eEF1A) sowohl shuttles Aminoacyl-tRNA (aa-tRNA) auf dem Ribosom bindet und B&uuml;ndel Actin. Eine einzelne Dom&auml;ne der eEF1A wird vorgeschlagen, Aktin, aa-tRNA und die Guanin-Nukleotid Exchange Faktor eEF1Balpha zu binden. Wir zeigen, dass eEF1Balpha hat die F&auml;higkeit, eEF1A-induzierte Aktin-Organisation zu st&ouml;ren. EEF1Balpha F163, die in dieser Dom&auml;ne bindet, die Mutationszucht Analyse zeigt Auswirkungen auf Wachstum, eEF1A Bindung, Nukleotid-Austausch-Aktivit&auml;t und Zellmorphologie. Diese Ph&auml;notypen k&ouml;nnen teilweise durch ein intragenic W130A-Mutation wiederhergestellt werden. Dar&uuml;ber hinaus stellt die Kombination von F163A mit der letalen Mutation K205A Lebensf&auml;higkeit eEF1Balpha Affinit&auml;t f&uuml;r eEF1A drastisch zu reduzieren. Hieraus resultiert auch eine konsequente Zunahme Aktin zu b&uuml;ndeln und teilweise korrigierte Morphologie. Die Folgen der &Uuml;berlappung funktioniert in dieser Dom&auml;ne eEF1A und seine einzigartige Unterschiede von der bakteriellen UCP1 bieten eine neuartige Funktion f&uuml;r eEF1Balpha, die Doppelrolle in der Aktin-B&uuml;ndelung und Protein-Synthese auszugleichen.

Koordinierung der eukaryotischen &Uuml;bersetzung Dehnung Faktor 1A (eEF1A) Funktion in Aktin Organisation und &Uuml;bersetzung Dehnung durch die Guanin-Nukleotid Exchange Faktor eEF1Balpha.

Marcus Lewis

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