in-vivo-quantification-g-protein-coupled-receptor-interactions-using

<em>In vivo</em> Quantification of G Protein Coupled Receptor Interactions using Spectrally Resolved Two-photon Microscopy

The study of protein interactions in living cells is an important area of research because the information accumulated both benefits industrial ...

We report an improved method for production of microfluidic device masters using two-photon photopolymerization of SU-8 negative photoresist, which relies on a two-photon microscope (TPM) commonly used in imaging of biological samples. The device masters serve as negative relief structures for polydimethylsiloxane-based microfluidic devices. We observed that not only did the two-photon excitation of the SU-8 photoresist initiate crosslinking of the material in the region of the focus of the near-infrared laser beam (as expected) but it also resulted in emission of fluorescence in the visible range. The detected emission of SU-8 photoresist undergoing two-photon excitation displayed a strong correlation with the size of the polymerized objects produced during the exposure; this allowed the progress of the microfluidic master production process to be monitored in real-time. We demonstrate the use of the fluorescence detection during two-photon photopolymerization in the production of microfluidic devices, which were designed to trap individual yeast cells to be imaged with the same TPM used for microfluidic master writing.

Real-time monitoring of two-photon photopolymerization for use in fabrication of microfluidic devices.

Wir berichten &uuml;ber eine verbesserte Methode zur Herstellung der Microfluidic Ger&auml;t Meister mit zwei-Photonen-Photopolymerisation von SU-8 negative Fotolack, die auf einem zwei-Photonen-Mikroskop (TPM) h&auml;ufig verwendet in der Bildgebung von biologischen Proben angewiesen ist. Die Ger&auml;t Herren dienen als negative Relief-Strukturen f&uuml;r mikrofluidische Polydimethylsiloxan-basierte Ger&auml;te. Wir beobachteten, dass nicht nur die zwei-Photonen-Erregung des SU-8-Fotolack Vernetzung des Materials in der Region im Mittelpunkt der Nah-Infrarot-Laserstrahl initiieren hat (wie erwartet), aber es f&uuml;hrte auch zu Emission von Fluoreszenz im sichtbaren Bereich. Die erkannte Emission von SU-8 Fotolack unterzogen zwei-Photonen-Erregung angezeigt eine starke Korrelation mit der Gr&ouml;&szlig;e der polymerisierten Objekte produziert w&auml;hrend der Belichtung; Dies erm&ouml;glichte den Fortschritt des Produktionsprozesses mikrofluidische Meister in Echtzeit &uuml;berwacht werden. Wir zeigen die Verwendung der Fluoreszenzdetektion w&auml;hrend zwei-Photonen-Photopolymerisation bei der Herstellung von Microfluidic Vorrichtungen, die entworfen wurden, um einzelne Hefezellen, die mit dem gleichen TPM verwendet Meister Autorenpreis mikrofluidische abgebildet werden auffangen.

Michael Stoneman

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