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Isolation and Culture of Human Fungiform Taste Papillae Cells

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple ...

Taste cells have a limited life span and are replaced from a basal cell population, although the specific factors involved in this process are not well known. Short- and long-term cultures of other sensory cells have facilitated efforts to understand the signals involved in proliferation, differentiation, and senescence, yet few studies have reported successful primary culture protocols for taste cells. Furthermore, no studies have demonstrated both proliferation and differentiation in vitro. In this study, we have developed an in vitro culture system to maintain and utilize rat primary taste cells for more than 2 months without losing key molecular and biochemical features. Gustducin, phospholipase C-beta2 (PLC-beta2), T1R3, and T2R5 mRNA were detected in the cultured cells by reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Western blot analysis demonstrated gustducin and PLC-beta2 expression in the same samples, which was confirmed by immunocytochemistry. Labeling with bromo-2-deoxyuridine (BrdU) demonstrated proliferation, and a subset of BrdU-labeled cells were also immunoreactive for either gustducin or PLC-beta2, indicating differentiation of newly generated cells in vitro. Cultured cells also exhibited increases in intracellular calcium in response to several taste stimuli. These results indicate that taste cells from adult rats can be generated and maintained under the described conditions for at least 2 months. This system will enable further studies of the processes involved in proliferation, differentiation, and function of mammalian taste receptor cells in an in vitro preparation.

Characterization and long-term maintenance of rat taste cells in culture.

Geschmack-Zellen haben eine begrenzte Lebensdauer und sind aus einer Population Basale Zellen ersetzt, wobei die spezifischen Faktoren, die in diesen Prozess eingebunden nicht bekannt sind. Kurz- und langfristige Kulturen der anderen Sinneszellen haben Bem&uuml;hungen zu verstehen, die Proliferation, Differenzierung und Seneszenz beteiligt Signale erleichtert, doch nur wenige Studien haben erfolgreiche Prim&auml;rkultur Protokolle f&uuml;r Geschmack Zellen berichtet. Dar&uuml;ber hinaus haben keine Studien Proliferation und Differenzierung in-vitro gezeigt. In dieser Studie entwickelten wir eine in-vitro-Kultursystem zur Erhaltung und Ratte prim&auml;ren Geschmack Zellen f&uuml;r mehr als 2 Monate ohne Verlust der wichtige Molekulare und biochemische Funktionen zu nutzen. Gustducin, Phospholipase C-beta2 (PLC-beta2), T1R3, und T2R5-mRNA in den kultivierten Zellen durch Reverse Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion erkannt wurden. Western-Blot-Analyse zeigte Gustducin und PLC-beta2 Ausdruck in den gleichen Proben von Immunocytochemistry best&auml;tigt wurde. Kennzeichnung mit Bromo-2-Deoxyuridine (BrdU) zeigte Verbreitung und eine Teilmenge der BrdU-markierten Zellen wurden auch immunreaktivem f&uuml;r Gustducin oder PLC-beta2, angibt, Differenzierung der neu erzeugten Zellen in vitro. Kultivierte Zellen zeigte auch Erh&ouml;hungen der intrazellul&auml;re Kalzium in Reaktion auf verschiedene Reize der Geschmack. Diese Ergebnisse zeigen, dass Geschmack Zellen von Erwachsenen Ratten erzeugt und unter den beschriebenen Bedingungen f&uuml;r mindestens 2 Monate aufrechterhalten werden k&ouml;nnen. Dieses System erm&ouml;glicht weitere Studien &uuml;ber die Prozesse in der Proliferation, Differenzierung und Funktion der S&auml;ugetier-Geschmack Rezeptor Zellen in eine in-vitro-Vorbereitung.

Article	Year
Journal of virology\| PubMed ID: 12186923	2002
Journal of biosciences\| PubMed ID: 16052077	2005
Characterization and long-term maintenance of rat taste cells in culture. Chemical senses\| PubMed ID: 16452455	2006
Journal of neuroscience methods\| PubMed ID: 16860395	2007
Journal of immunoassay & immunochemistry\| PubMed ID: 21253967	2011

Hakan Ozdener

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