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Dissection of <em>Saccharomyces Cerevisiae</em> Asci

Yeast is a highly tractable model system that is used to study many different cellular processes. The common laboratory strain Saccharomyces cerevisiae ...

Mutations in the trafficking protein particle complex C2 protein (TRAPPC2), a mammalian ortholog of yeast Trs20p and a component of the trafficking protein particle (TRAPP) vesicle tethering complex, have been linked to the skeletal disorder spondyloepiphyseal dysplasia tarda (SEDT). Intriguingly, the X-linked TRAPPC2 is just one of a complement of Trs20-related genes in humans. Here we characterize TRAPPC2L, a novel, highly conserved TRAPP-interacting protein related to TRAPPC2 and the uncharacterized yeast open reading frame YEL048c. TRAPPC2L and TRAPPC2 genes are found in pairs across species and show broad and overlapping expression, suggesting they are functionally distinct, a notion supported by yeast complementation studies and biochemical characterization. RNA interference-mediated knockdown of either TRAPPC2L or TRAPPC2 in HeLa cells leads to fragmentation of the Golgi, implicating both proteins in Golgi dynamics. Gradient fractionation of cellular membranes indicates that TRAPPC2L is found with a portion of cellular TRAPP on very low-density membranes whereas the remainder of TRAPP, but not TRAPPC2L, is found associated with Golgi markers. YEL048c displays genetic interactions with TRAPP II-encoding genes and the gene product co-fractionates with and interacts with yeast TRAPP II. Taken together these results indicate that TRAPPC2L and its yeast ortholog YEL048c are novel TRAPP-interacting proteins that may modulate the function of the TRAPP II complex.

TRAPPC2L is a novel, highly conserved TRAPP-interacting protein.

Mutationen in den Drogenhandel Protein Partikel komplexe C2 Protein (TRAPPC2), ein S&auml;ugetier-Ortholog Hefe Trs20p und Bestandteil der Menschenhandel Protein Partikel (TRAPP) Vesikel Anbindehaltung Komplex, verkn&uuml;pft wurden die Skelett-Erkrankung, spondyloepiphys&auml;re, verz&ouml;gerte (SEDT). Interessanterweise geh&ouml;rt der X-chromosomalen TRAPPC2 nur ein Satz von Genen im Zusammenhang mit Trs20, beim Menschen. Hier pr&auml;gen wir TRAPPC2L, eine neuartige, stark konservierten TRAPP-Interaktion Protein im Zusammenhang mit TRAPPC2 und die offene Leseraster YEL048c von uncharakterisiertes Hefe. TRAPPC2L und TRAPPC2-gen sind paarweise Arten gefunden und zeigen eine Breite und &uuml;berlappende Ausdruck, was darauf hindeutet, dass sie funktionell unterscheiden, eine Vorstellung von Hefe Komplementation Studien und biochemische Charakterisierung. RNA Interferenz-vermittelte Niederschlag von TRAPPC2L oder TRAPPC2 in HeLa-Zellen f&uuml;hrt zur Fragmentierung des Golgi, zielbewu&szlig;t beide Proteine in Golgi-Dynamik. Gradient Fraktionierung von Zellmembranen zeigt, dass TRAPPC2L mit einem Teil der zellul&auml;ren TRAPP auf sehr niedriger Dichte Membranen gefunden wird, w&auml;hrend der Rest der TRAPP, aber nicht TRAPPC2L, zugeordnete Golgi Marker gefunden ist. YEL048c zeigt genetische Interaktionen mit TRAPP II-Kodierung Gene und das Genprodukt mit co-fractionates und interagiert mit Hefe TRAPP II. Zusammengenommen zeigen diese Ergebnisse, dass TRAPPC2L und seine Hefe Ortholog YEL048c Roman TRAPP-Interaktion Proteine sind, die die Funktion des komplexen TRAPP II modulieren kann.

Audrey Morin

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