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Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

W&auml;&szlig;rige zweiphasige Systeme bieten eine schnelle, leicht skalierbare Methode zur Trennung von l&ouml;slichen Proteinen unl&ouml;sliche Materialien und andere unerw&uuml;nschte Proteine. Die Methode kann im kontinuierlichen Modus betrieben werden. Eignet sich besonders f&uuml;r tierische Proteine, wie es Schwierigkeiten anderer Methoden &uuml;berwindet bei der Beseitigung von unl&ouml;slichen Sch&uuml;ttgut, w&auml;hrend gleichzeitig die Reinigung in Bezug auf insgesamt l&ouml;sliches Protein. Dieser Artikel beschreibt die Entwicklung von Methoden f&uuml;r w&auml;ssrige Zweiphasen-Extraktion und Reinigung von tierischen Proteinen, sowohl im Labor als auch im pilot Ma&szlig;stab. Die st&auml;rken, Schw&auml;chen und m&ouml;gliche Zukunftsperspektiven f&uuml;r die Methode werden diskutiert.

W&auml;&szlig;rige zweiphasige Extraktion und Reinigung von tierischen Proteinen.

Aqueous two-phase systems provide a rapid, easily scalable method for separation of soluble proteins from insoluble materials and other undesired proteins. The method can be operated in continuous mode. It is particularly useful for animal proteins, as it overcomes difficulties of other methods in removing bulk insoluble material, while at the same time providing purification with respect to total soluble protein. This article describes the development of methods for aqueous two-phase extraction and purification of animal proteins, at both laboratory and pilot scale. The strengths, weaknesses, and possible future prospects for the method are discussed.

Aqueous two-phase extraction and purification of animal proteins.

Twenty-nine multiparous cows of each of the Jersey and Friesian breeds, all kappa-casein AB phenotype, were grazed together and managed identically. On three occasions during 10 d in spring (early lactation), milk was collected from all cows at four consecutive milkings and bulked according to breed. On a separate occasion, milk samples were also collected from each cow at consecutive a.m. and p.m. milkings to form one daily sample per cow. The bulked milks (800-1000 l per breed on each occasion) were standardized to a protein:fat (P:F) ratio of 0.80, and 350 l from each breed was made into Cheddar cheese. The solids content of the remaining Friesian milk was then increased by ultrafiltration to a solids concentration equal to that of the Jersey milk. This solids-standardized Friesian milk and a replicate batch of P:F standardized Jersey milk were made into two further batches of Cheddar cheese in 350-l vats. Compared with Friesian milk, Jersey milk had higher concentrations of most milk components measured, including protein, casein and fat. There were few difference in milk protein composition between breeds, but there were differences in fat composition. Friesian milk fat had more conjugated linoleic acid (CLA) than Jersey milk fat. Jersey milk coagulated faster and formed firmer curd than Friesian milk. Concentrations of some milk components were correlated with coagulation parameters, but relationships did not allow prediction of cheesemaking potential. Jersey milk yielded 10% more cheese per kg than Friesian milk using P:F standardized milk, but for milks with the same solids concentration there were no differences in cheese yield. No differences in cheese composition between breeds were detected. Differences in cheesemaking properties of milk from Jerseys and Friesians were entirely related to the concentrations of solids in the original milk.

A comparison of the composition, coagulation characteristics and cheesemaking capacity of milk from Friesian and Jersey dairy cows.

Neunundzwanzig multiparous K&uuml;he jedes Trikot und ostfriesischen Rassen, alle Kappa-Kasein AB Ph&auml;notyp, waren streifte zusammen und konnten identisch. Bei drei Gelegenheiten w&auml;hrend 10D im Fr&uuml;hjahr (fr&uuml;hen Laktation) Milch war alle K&uuml;he an vier aufeinander folgenden Melkungen entnommen und gew&ouml;lbten nach Rasse. Bei einem separaten Gelegenheit wurden Milchproben auch von jeder Kuh an aufeinanderfolgenden a.m. und p.m. Melkungen bilden eine t&auml;gliche Auswahl pro Kuh gesammelt. Die Einf&uuml;llg&uuml;ter Milcharten (800-1000 l pro Rasse jedesmal) wurden zu einem Protein: Fett (P:F)-Verh&auml;ltnis von 0,80, standardisiert und 350 l aus jeder Rasse in Cheddar-K&auml;se gemacht wurde. Der Feststoffgehalt der verbleibenden friesischen Milch wurde dann durch Ultrafiltration zu einer festen K&ouml;rper-Konzentration gleich dem der Jersey-Milch erh&ouml;ht. Diese Feststoffe-standardisierte Friesenpferde-Milch und einen replizieren Stapel von P:F standardisiert Jersey Milch wurden in zwei weiteren Batches Cheddar-K&auml;se in 350-l-F&auml;sser. Im Vergleich mit friesischen Milch, hatte Jersey-Milch h&ouml;here Konzentrationen der meisten Milchbestandteile gemessen, einschlie&szlig;lich Protein, Kasein und Fett. Gab es wenig Unterschied in der Milch-Protein-Komposition zwischen Rassen, aber es gab Unterschiede in der Fettzusammensetzung. Friesische Milchfett hatte mehr Linols&auml;ure (CLA) als Jersey Milchfett konjugiert. Jersey-Milch koaguliert schneller und fester Quark als friesische Milch gebildet. Konzentrationen von einigen Milchbestandteile wurden mit Koagulation Parametern korreliert, aber Beziehungen erlaubte nicht Vorhersage der K&auml;sefabrikation potenzielle. Jersey-Milch ergab 10 % mehr K&auml;se pro kg als friesische Milch mit P:F standardisierte Milch, aber f&uuml;r die Milch mit der gleichen Feststoffkonzentration es wurden keine Unterschiede in der K&auml;se-Ausbeute. Keine Unterschiede in der Zusammensetzung der K&auml;se zwischen Rassen wurden entdeckt. Unterschiede in der K&auml;seherstellung Eigenschaften der Milch von Trikots und Friesen bezogen sich ausschlie&szlig;lich auf die Konzentrationen von Feststoffen in der urspr&uuml;nglichen Milch.

Ein Vergleich der Zusammensetzung, Gerinnung Merkmale und K&auml;seherstellung Kapazit&auml;t von Milch von Friesen und Jersey Milchk&uuml;he.

Changes in the structure and chemistry of beta-lactoglobulin (beta-LG) play an important role in the processing and functionality of milk products. In model beta-LG systems, there is evidence that the aggregates of heated beta-LG are held together by a mixture of intermolecular non-covalent association and heat-induced non-native disulfide bonds. Although a number of non-native disulfide bonds have been identified, little is known about the initial inter- and intramolecular disulfide bond rearrangements that occur as a result of heating. These interchange reactions were explored by examining the products of heat treatment to determine the novel disulfide bonds that form in the heated beta-LG aggregates. The native protein and heat-induced aggregates were hydrolyzed by trypsin, and the resulting peptides, before and after reduction with dithiothreitol, were separated by high-performance liquid chromatography and their identities confirmed by electrospray ionization mass spectrometry. Comparisons of these peptide patterns showed that some of the Cys160 was in the reduced form in heated beta-LG aggregates, indicating that the Cys160-Cys66 disulfide bond had been broken during heating. This finding suggests that disulfide bond interchange reactions between beta-LG non-native monomers, or polymers, and other proteins could occur largely via Cys160.

Heat-induced redistribution of disulfide bonds in milk proteins. 1. Bovine beta-lactoglobulin.

Ver&auml;nderungen in der Struktur und der Chemie des Beta-Lactoglobulin (Beta-LG) spielen eine wichtige Rolle in der Verarbeitung und die Funktionen von Molkereierzeugnissen. In Beta-LG Modellsysteme gibt es Hinweise darauf, dass die Aggregate des beheizten Beta-LG gehalten zusammen, durch eine Mischung der intermolekularen nicht-kovalente Association und induziert durch Hitze nicht heimischer Disulfidbr&uuml;cken. Obwohl eine Reihe von nicht-Native Disulfidbr&uuml;cken identifiziert wurden, ist wenig bekannt &uuml;ber die erste Inter- und intramolekulare Disulfid-Bond-Umlagerungen, die infolge Heizung auftreten. Diese Anschlussstelle Reaktionen wurden erforscht, untersucht die Produkte der W&auml;rmebehandlung den neuartige Disulfidbr&uuml;cken dieser Form in den beheizten Beta-LG-Aggregaten bestimmen. Die native Protein und induziert durch Hitze Aggregate wurden durch Trypsin hydrolysiert, und die resultierenden Peptiden, vor und nach der Reduktion mit Dithiothreitol, unterschieden durch Hochleistungs-Fl&uuml;ssigkeitschromatographie und ihre Identit&auml;ten von Elektrospray-Ionisation-Massenspektrometrie best&auml;tigt. Vergleiche diese Peptid-Muster zeigte, dass einige der Cys160 in die reduzierte Form in beheizten Beta-LG-Aggregate, die darauf hinweist, dass die Cys160-Cys66-Disulfidbindung w&auml;hrend Heizung defekt gewesen. Dieser Befund legt nahe, dass Disulfid Bond Anschlussstelle Reaktionen zwischen Beta-LG Drittprogrammen Monomere, Polymere oder andere Proteine &uuml;berwiegend &uuml;ber Cys160 auftreten k&ouml;nnten.

Hitze-induzierte Umverteilung von Disulfidbr&uuml;cken in Milchproteine. 1. Rinder Beta-Lactoglobulin.

W&auml;rmebehandlung von Milch bewirkt, dass die Hitze-denaturable Molkenproteine auf Aggregat mit Kappa-Kasein (Kappa-CN) &uuml;ber Thiol-Disulfid Bond Anschlussstelle Reaktionen. Die besondere Disulfidbr&uuml;cken, die wichtige in der Aggregate sind sind ungewiss, obwohl Cys(121) von Beta-Lactoglobulin (Beta-LG) hat verwickelt war. Die Reaktion bei 60 Grad C zwischen Beta-LG A und eine aktivierte Kappa-CN bildeten kleine Disulfid-verbundene Aggregate. Die tryptic Peptide aus diesem Modellsystem enthalten ein Peptid mit eine Disulfidbindung zwischen Cys R&uuml;ckst&auml;nde in der Dreifach-Cys-Peptid [beta-LG(102-124)] und Kappa-CN Cys(88) u. a. zwischen Kappa-CN Cys(88) oder Kappa-CN Cys(11) und Beta-LG Cys(160). Nur die letzteren zwei neuartige Disulfid, die Anleihen in identifiziert wurden erhitzt (90 Grad C/20 min) Milch. Anwendung der computational Suche tools, insbesondere MS2Assign und SearchXLinks, die Massenspektrometrie (MS) und die Kollision-induzierte Dissoziation (CID)-MS-Daten war sehr wertvoll f&uuml;r die Identifizierung m&ouml;glich Disulfid-gebundenen Peptide. In beiden F&auml;llen Peptide mit gemessenen Massen von 4275.07 und 2312.07 wurden versuchsweise zugewiesen beta-LG(102-135):kappa-CN(11-13) und Beta-LG A(61-69):kappa-CN(87-97), beziehungsweise. Jedoch zeigte die Sequenzierung mittels der CID-MS Daten, dass sie, in der Tat, beta-LG(1-40) und beta-LG(41-60), bzw.. Diese Studie unterst&uuml;tzt das Konzept, dass reversible intramolekulare Disulfidbindung Anschlussstelle die intermolekularen Austausch Reaktionen vorausgeht.

Hitze-induzierte Umverteilung von Disulfidbr&uuml;cken in Milchproteine. 2. Disulfide Verklebung Muster zwischen Rindern Beta-Lactoglobulin und Kappa-Kasein.

Heat treatment of milk causes the heat-denaturable whey proteins to aggregate with kappa-casein (kappa-CN) via thiol-disulfide bond interchange reactions. The particular disulfide bonds that are important in the aggregates are uncertain, although Cys(121) of beta-lactoglobulin (beta-LG) has been implicated. The reaction at 60 degrees C between beta-LG A and an activated kappa-CN formed small disulfide-bonded aggregates. The tryptic peptides from this model system included a peptide with a disulfide bond between a Cys residue in the triple-Cys peptide [beta-LG(102-124)] and kappa-CN Cys(88) and others between kappa-CN Cys(88) or kappa-CN Cys(11) and beta-LG Cys(160). Only the latter two novel disulfide bonds were identified in heated (90 degrees C/20 min) milk. Application of computational search tools, notably MS2Assign and SearchXLinks, to the mass spectrometry (MS) and collision-induced dissociation (CID)-MS data was very valuable for identifying possible disulfide-bonded peptides. In two instances, peptides with measured masses of 4275.07 and 2312.07 were tentatively assigned to beta-LG(102-135):kappa-CN(11-13) and beta-LG A(61-69):kappa-CN(87-97), respectively. However, sequencing using the CID-MS data demonstrated that they were, in fact, beta-LG(1-40) and beta-LG(41-60), respectively. This study supports the notion that reversible intramolecular disulfide-bond interchange precedes the intermolecular interchange reactions.

Heat-induced redistribution of disulfide bonds in milk proteins. 2. Disulfide bonding patterns between bovine beta-lactoglobulin and kappa-casein.

[Promoter methylation and mRNA expression of MCF10 model cell lines of breast cancer].

[Promotor-Methylierung und mRNA-Expression von MCF10 Modell Zelllinien von Brustkrebs].

Den Projekttr&auml;ger Methylierung Status und mRNA Ausdruck des APC-Gens in MCF10 Modell der Brust Fortschreiten zu untersuchen.

[Promoter-Methylierung und mRNA Ausdruck des APC-Gens in MCF10 Brust-Krebs-Modell].

To investigate the promoter methylation status and mRNA expression of APC gene in MCF10 model of breast cancer progression.

[Promoter methylation and mRNA expression of APC gene in MCF10 breast cancer model].

To investigate the role of WT1 gene in breast carcinogenesis by analyses of the promoter methylation status and mRNA expression of WT1 gene in MCF10 model system of breast cancer progression.

[Promoter methylation and mRNA expression of WT1 gene in MCF10 breast cancer model].

Die Rolle der WT1-gen in Brust Karzinogenese durch Analysen der Projekttr&auml;ger Methylierung Status und mRNA Ausdruck der WT1-gen in MCF10 Modellsystem der Brust Fortschreiten zu untersuchen.

[Promoter-Methylierung und mRNA Ausdruck WT1-gen in MCF10 Brust-Krebs-Modell].

Methylation of cytosine residues in CpG dinucleotides plays an important role in epigenetic regulation of gene expression and chromatin structure/stability in higher eukaryotes. DNA methylation patterns are established and maintained at CpG dinucleotides by DNA methyltransferases (Dnmt1, Dnmt3a, and Dnmt3b). In mammals and many other eukaryotes, the CpG dinucleotide is underrepresented in the genome. This loss is postulated to be the result of unrepaired deamination of cytosine and 5-methylcytosine to uracil and thymine, respectively. Two thymine glycosylases are believed to reduce the impact of 5-methylcytosine deamination. G/T mismatch-specific thymine-DNA glycosylase (Tdg) and methyl-CpG binding domain protein 4 can both excise uracil or thymine at U.G and T.G mismatches to initiate base excision repair. Here, we report the characterization of interactions between Dnmt3b and both Tdg and methyl-CpG binding domain protein 4. Our results demonstrate (1) that both Tdg and Dnmt3b are colocalized to heterochromatin and (2) reduction of T.G mismatch repair efficiency upon loss of DNA methyltransferase expression, as well as a requirement for an RNA component for correct T.G mismatch repair.

Characterization of Dnmt3b:thymine-DNA glycosylase interaction and stimulation of thymine glycosylase-mediated repair by DNA methyltransferase(s) and RNA.

Methylierung von Cytosin R&uuml;ckst&auml;nde in CpG-Dinucleotides spielt eine wichtige Rolle in epigenetische Regulierung der Genexpression und Chromatin Struktur und Stabilit&auml;t in den h&ouml;heren Eukaryotes. DNA-Methylierungsmuster erstellt und fortgeschrieben am CpG Dinucleotides durch DNA-Methyltransferasen (Dnmt1, Dnmt3a und Dnmt3b). In S&auml;ugetieren und vielen anderen Eukaryoten ist die CpG dinucleotid im Genom unterrepr&auml;sentiert. Dieser Verlust wird postuliert, um das Ergebnis des nicht reparierten Deamination Cytosin und Uracil und Thymin, 5-Methylcytosine zu sein, beziehungsweise. Zwei Thymin Glycosylases werden geglaubt, um die Auswirkungen der 5-Methylcytosine Deamination verringern. G/T stimmen nicht &uuml;berein-spezifische Thymin-DNA Glycosylase (Tdg) und methyl--CpG verbindliches Dom&auml;ne Protein 4 k&ouml;nnen beide Uracil oder Thymin bei U.G und TG Missverh&auml;ltnisse base Excision Repair initiieren Verbrauchsteuern. Hier berichten wir &uuml;ber die Charakterisierung der Interaktionen zwischen Dnmt3b, Tdg und methyl--CpG verbindliches Dom&auml;ne Protein 4. Unsere Ergebnisse zeigen (1), dass Tdg und Dnmt3b Heterochromatin und (2) die Reduzierung der TG Fehlanpassung Reparatur Effizienz bei Verlust der DNA Methyltransferase Ausdruck sowie eine Anforderung f&uuml;r eine RNA-Komponente zur richtigen TG Fehlanpassung Reparatur colocalized sind.

Charakterisierung der Dnmt3b:thymine-DNA Glycosylase Interaktion und Stimulation von Thymin Glycosylase-vermittelte zu reparieren, indem Sie Methyltransferase(s) der DNA und RNA.

Recent landmark experiments have shown that transient overexpression of a small number of transcription factors can reprogram differentiated cells into induced pluripotent stem (iPS) cells that resemble embryonic stem (ES) cells. These iPS cells hold great promise for medicine because they have the potential to generate patient-specific cell types for cell replacement therapy and produce in vitro models of disease, without requiring embryonic tissues or oocytes. Although current iPS cell lines resemble ES cells, they have not passed the most stringent test of pluripotency by generating full-term or adult mice in tetraploid complementation assays, raising questions as to whether they are sufficiently potent to generate all of the cell types in an organism. Whether this difference between iPS and ES cells reflects intrinsic limitations of direct reprogramming is not known. Here we report fertile adult mice derived entirely from iPS cells that we generated by inducible genetic reprogramming of mouse embryonic fibroblasts. Producing adult mice derived entirely from a reprogrammed fibroblast shows that all features of a differentiated cell can be restored to an embryonic level of pluripotency without exposure to unknown ooplasmic factors. Comparing these fully pluripotent iPS cell lines to less developmentally potent lines may reveal molecular markers of different pluripotent states. Furthermore, mice derived entirely from iPS cells will provide a new resource to assess the functional and genomic stability of cells and tissues derived from iPS cells, which is important to validate their utility in cell replacement therapy and research applications.

Adult mice generated from induced pluripotent stem cells.

Den letzten Wahrzeichen-Experimente haben gezeigt, dass vor&uuml;bergehend eine &Uuml;berexpression von einer kleinen Anzahl von Transkriptionsfaktoren kann differenzierte Zellen umzuprogrammieren, in induzierte pluripotente Stammzellen (iPS) Zellen, die embryonale Stammzellen (ES) &auml;hneln. Diese iPS-Zellen halten viel versprechend f&uuml;r Medizin, weil sie das Potenzial haben, Patienten-spezifischen Zelltypen f&uuml;r Zelle-Ersatz-Therapie zu generieren und in-vitro-Modelle der Krankheit, ohne embryonalen Gewebe oder Eizellen zu produzieren. Obwohl aktuelle iPS-Zelllinien ES Zellen &auml;hneln, haben sie nicht den strengsten Test der Pluripotenz &uuml;bergeben, durch die Generierung von endg&uuml;ltigen oder adulte M&auml;use bei tetraploide Komplementation-Assays, wirft Fragen auf, ob sie ausreichend stark, um all die Zelltypen im Organismus zu generieren sind. Ob dieser Unterschied zwischen iPS und ES Zellen immanente Grenzen der direkte Reprogrammierung widerspiegelt, ist nicht bekannt. Hier berichten wir fruchtbare Erwachsene M&auml;usen abgeleitet iPS-Zellen, die wir durch Induktion erh&auml;ltliche genetische Umprogrammierung der M&auml;useembryonalen generiert. Herstellung von Erwachsene M&auml;usen abgeleitet eine umprogrammiert Fibroblast zeigt, dass alle Funktionen einer differenzierten Zelle zu einem embryonalen Niveau von Pluripotenz ohne Belastung durch unbekannte Ooplasmic Faktoren wiederhergestellt werden k&ouml;nnen. Vergleicht man diese vollst&auml;ndig pluripotente iPS Zelllinien zu weniger entwicklungspolitisch kannst potente Linien molekulare Marker der verschiedenen pluripotenten Staaten aufdecken. Dar&uuml;ber hinaus bieten M&auml;usen abgeleitet iPS-Zellen eine neue Ressource, um die funktionale und genomische Stabilit&auml;t der Zellen und Gewebe abgeleitet von iPS-Zellen, die ihren Nutzen in der Zelle-Ersatz-Therapie und Forschungsanwendungen validieren wichtig ist zu beurteilen.

Erwachsene M&auml;use aus induzierten pluripotenten Stammzellen erzeugt.

The biomedical utility of induced pluripotent stem cells (iPSCs) will be diminished if most iPSC lines harbor deleterious genetic mutations. Recent microarray studies have shown that human iPSCs carry elevated levels of DNA copy number variation compared with those in embryonic stem cells, suggesting that these and other classes of genomic structural variation (SV), including inversions, smaller duplications and deletions, complex rearrangements, and retroelement transpositions, may frequently arise as a consequence of reprogramming. Here we employ whole-genome paired-end DNA sequencing and sensitive mapping algorithms to identify all classes of SV in three fully pluripotent mouse iPSC lines. Despite the improved scope and resolution of this study, we find few spontaneous mutations per line (one or two) and no evidence forÂ endogenous retroelement transposition. These results show that genome stability can persist throughout reprogramming, and argue that it is possible to generate iPSCs lacking gene-disrupting mutations using current reprogramming methods.

Genome sequencing of mouse induced pluripotent stem cells reveals retroelement stability and infrequent DNA rearrangement during reprogramming.

Das biomedizinische Dienstprogramm von induzierten pluripotenten Stammzellen (iPSCs) wird verringert, wenn die meisten iPSC-Linien sch&auml;dliche Genmutationen Hafen. Neuere Microarray Studien zeigten, dass menschliche iPSCs tragen erh&ouml;hten DNA Copy Number variants im Vergleich zu denen in embryonale Stammzellen, die darauf hindeutet, dass diese und andere Klassen von genomischen strukturellen Variationen (SV), einschlie&szlig;lich Inversionen, kleinere Duplikationen und L&ouml;schungen, komplexe Umlagerungen und Retroelement Transpositionen, h&auml;ufig als Folge der Neuprogrammierung entstehen k&ouml;nnen. Hier besch&auml;ftigen wir ganze gepaart-End DNA Genoms und sensible Zuordnung Algorithmen um alle Klassen des SV in drei voll pluripotenten Maus iPSC Zeilen zu identifizieren. Trotz der verbesserten Anwendungsbereich und Aufl&ouml;sung dieser Studie, finden wir einige spontane Mutationen pro Zeile (maximal zwei) und keine Beweise f&uuml;r die endogene Retroelement Umsetzung. Diese Ergebnisse zeigen, dass die Genomstabilit&auml;t kann im gesamten Neuprogrammierung beibehalten und argumentieren, dass iPSCs fehlt Unterbrechung der Gen-Mutationen, die mit aktuelle Neuprogrammierung Methoden generieren kann.

Sequenzierung des Genoms Maus induzierte pluripotente Stammzellen offenbart Retroelement Stabilit&auml;t und selten DNA-Umlagerung w&auml;hrend Neuprogrammierung.

Article	Year
Aqueous two-phase extraction and purification of animal proteins. Molecular biotechnology\| PubMed ID: 11876302	2002
A comparison of the composition, coagulation characteristics and cheesemaking capacity of milk from Friesian and Jersey dairy cows. The Journal of dairy research\| PubMed ID: 15068067	2004
Heat-induced redistribution of disulfide bonds in milk proteins. 1. Bovine beta-lactoglobulin. Journal of agricultural and food chemistry\| PubMed ID: 15675818	2004
Heat-induced redistribution of disulfide bonds in milk proteins. 2. Disulfide bonding patterns between bovine beta-lactoglobulin and kappa-casein. Journal of agricultural and food chemistry\| PubMed ID: 15675819	2004
[Promoter methylation and mRNA expression of MCF10 model cell lines of breast cancer]. Zhonghua bing li xue za zhi Chinese journal of pathology\| PubMed ID: 15938832	2005
[Promoter methylation and mRNA expression of APC gene in MCF10 breast cancer model]. Zhonghua bing li xue za zhi Chinese journal of pathology\| PubMed ID: 16608647	2006
[Promoter methylation and mRNA expression of WT1 gene in MCF10 breast cancer model]. Zhonghua bing li xue za zhi Chinese journal of pathology\| PubMed ID: 17706117	2007
Characterization of Dnmt3b:thymine-DNA glycosylase interaction and stimulation of thymine glycosylase-mediated repair by DNA methyltransferase(s) and RNA. Journal of molecular biology\| PubMed ID: 18452947	2008
Adult mice generated from induced pluripotent stem cells. Nature\| PubMed ID: 19672243	2009
Genome sequencing of mouse induced pluripotent stem cells reveals retroelement stability and infrequent DNA rearrangement during reprogramming. Cell stem cell\| PubMed ID: 21982236	2011

Michael J. Boland

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