a-neuronal-astrocyte-co-culture-assay-for-high-content-analysis

A Neuronal and Astrocyte Co-Culture Assay for High Content Analysis of Neurotoxicity

High Content Analysis (HCA) assays combine cells and detection reagents with automated imaging and powerful image analysis algorithms, allowing ...

Non-small cell lung cancers (NSCLCs) bearing mutations in the tyrosine kinase domain (TKD) of the epidermal growth factor receptor (EGFR) often exhibit dramatic sensitivity to the EGFR tyrosine kinase inhibitors gefitinib and erlotinib. Ionizing radiation (IR) is frequently used in the treatment of NSCLC, but little is known how lung tumor-acquired EGFR mutations affect responses to IR. Because this is of great clinical importance, we investigated and found that clonogenic survival of mutant EGFR NSCLCs in response to IR was reduced 500- to 1,000-fold compared with wild-type (WT) EGFR NSCLCs. Exogenous expression of either the L858R point mutant or the DeltaE746-E750 deletion mutant form of EGFR in immortalized human bronchial epithelial cells, p53 WT NSCLC (A549), or p53-null NSCLC (NCI-H1299) resulted in dramatically increased sensitivity to IR. We show that the majority of mutant EGFR NSCLCs, including those that contain the secondary gefitinib resistance T790M mutation, exhibit characteristics consistent with a radiosensitive phenotype, which include delayed DNA repair kinetics, defective IR-induced arrest in DNA synthesis or mitosis, and pronounced increases in apoptosis or micronuclei. Thus, understanding how activating mutations in the TKD domain of EGFR contribute to radiosensitivity should provide new insight into effective treatment of NSCLC with radiotherapy and perhaps avoid emergence of single agent drug resistance.

Non-small-cell lung cancers with kinase domain mutations in the epidermal growth factor receptor are sensitive to ionizing radiation.

Nicht-kleinzelliger Lungenkrebs Krebs (NSCLCs) mit Mutationen in der Tyrosin-Kinase-Dom&auml;ne (TKD) von den epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) oft zeigen dramatische Empfindlichkeit der EGFR-Tyrosin-Kinase-Hemmer Gefitinib und Erlotinib. Ionisierende Strahlung (IR) wird h&auml;ufig zur Behandlung von NSCLC verwendet, aber ist wenig bekannt, wie Lunge Tumor erworbenen EGFR-Mutationen beeinflussen Antworten zu IR. Da dies von gro&szlig;er klinischer Bedeutung ist, wir untersucht und herausgefunden, dass Clonogenic &Uuml;berleben der Mutant, die EGFR-NSCLCs als Reaktion auf IR reduziert wurde 500 und 1,000 8-fach im Vergleich zu Wildtyp (WT) EGFR NSCLCs. exogene Ausdruck entweder den L858R-Punkt-Mutanten oder DeltaE746-E750 L&ouml;schung mutierte Form von EGFR in verewigt menschliche bronchiale Epithelzellen, p53, die drastisch erh&ouml;hte Empfindlichkeit gegen&uuml;ber IR. WT NSCLC (A549) oder p53-Null NSCLC (NCI-H1299) gef&uuml;hrt Wir zeigen, dass die Mehrheit der Mutant EGFR-NSCLCs, einschlie&szlig;lich derjenigen, die die sekund&auml;re Gefitinib Widerstand T790M Mutation, Ausstellung Merkmale mit einem radiosensitive Ph&auml;notyp, enthalten die verz&ouml;gerte DNA enthalten, Kinetik, defekte IR-induzierte Verhaftung im DNA-Synthese oder Mitose reparieren und deutliche Zuw&auml;chse in Apoptosis oder Mikrokernen. So sollte Verst&auml;ndnis wie aktivierende Mutationen in der TKD-Dom&auml;ne des EGFR zu Radiosensitivit&auml;t beitragen einen neuen Einblick in wirksame Behandlung des NSCLC mit Strahlentherapie und vielleicht vermeiden Entstehung der Monotherapie Medikamentenresistenz.

Nicht-kleinzelliger Lungenkrebs Krebs Kinase-Dom&auml;ne-Mutationen in den epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor sind empfindlich gegen&uuml;ber ionisierender Strahlung.

Stella Redpath

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications