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Genetic Study of Axon Regeneration with Cultured Adult Dorsal Root Ganglion Neurons

It is well known that mature neurons in the central nervous system (CNS) cannot regenerate their axons after injuries due to diminished intrinsic ability ...

We investigated the effect of progesterone on the nerve during lengthening of the limb in rats. The sciatic nerves of rats were elongated by leg lengthening for ten days at 3 mm per day. On alternate days between the day after the operation and nerve dissection, the progesterone-treated group received subcutaneous injections of 1 mg progesterone in sesame oil and the control group received oil only. On the fifth, tenth and 17th day, the sciatic nerves were excised at the midpoint of the femur and the mRNA expression level of myelin protein P0 was analysed by quantitative real time polymerase chain reaction. On day 52 nodal length was examined by electron microscopy, followed by an examination of the compound muscle action potential (C-MAP) amplitude and the motor conduction velocity (MCV) of the tibial nerve on days 17 and 52. The P0 (a major myelin glycoprotein) mRNA expression level in the progesterone-treated group increased by 46.6% and 38.7% on days five and ten, respectively. On day 52, the nodal length in the progesterone-treated group was smaller than that in the control group, and the MCV of the progesterone-treated group had been restored to normal. Progesterone might accelerate the restoration of demyelination caused by nerve elongation by activating myelin synthesis.

Effect of progesterone on recovery from nerve injury during leg lengthening in rats.

Wir untersuchten die Wirkung von Progesteron auf den Nerv w&auml;hrend der Verl&auml;ngerung des Gliedes bei Ratten. Die Nerven ischiadicus von Ratten wurden von Bein Verl&auml;ngerung f&uuml;r zehn Tage bei 3 mm pro Tag verl&auml;ngert. An alternativen Tagen zwischen dem Tag nach der Operation und Nerven Dissektion erhielt die Progesteron-Behandlungsgruppe subkutanen Injektionen von 1 mg Progesteron Sesam&ouml;l und das Steuerelement Gruppe empfangen &Ouml;l nur. Am f&uuml;nften wurden Zehnter und 17. Tag, den Ischias Nerven herausgeschnitten, auf dem Mittelpunkt des Femur und mRNA Ausdrucksebene des Myelin-Protein, das durch quantitative Real-Time Polymerase-Kettenreaktion P0 analysiert wurde. Am Tag wurde durch Elektronenmikroskopie, gefolgt von einer Pr&uuml;fung der zusammengesetzte Muskel-Aktionspotenzial (C-MAP)-Amplitude und die motorische Leitgeschwindigkeit (MCV) des Nervus tibialis am Tag 17 und 52 52 nodal L&auml;nge untersucht. Die P0 (eine gro&szlig;e Myelin-Glykoprotein) mRNA Ausdruck in der Progesteron-behandelten Gruppe erh&ouml;ht um 46,6 % und 38,7 % an Tagen f&uuml;nf und zehn, beziehungsweise. Am Tag 52 die nodal L&auml;nge in der Progesteron-behandelten Gruppe war kleiner als in der Kontrollgruppe und der MCV der Progesteron-behandelten Gruppe hatte normal restauriert worden. Progesteron kann die Wiederherstellung der Demyelinisierung verursacht durch Dehnung der Nerven durch die Aktivierung von Myelin Synthese beschleunigen.

Wirkung von Progesteron bei der Wiederherstellung von Nervenverletzung w&auml;hrend Bein Verl&auml;ngerung bei Ratten.

We investigated the effects of direct gradual lengthening of the distal stump of a peripheral nerve and subsequent nerve regeneration in rats. A segment 10 mm long was resected from rat sciatic nerve. The distal nerve stump was fixed to a ring and pulled directly at a rate of 1 mm/day using an original external nerve distraction device. After distraction for 10, 15, and 20 days, the lengthened nerves were evaluated macroscopically and immunocytochemically. At day 20, the mean (SD) distances from the ring to the 3 mm and 6 mm distal part, which were marked with sutures on the epineurium, were 7 (0.5) mm and 12.1 (0.5) mm, respectively, and the number of Schwann cells in the lengthening group had increased to twice that of control group. The distal stump of a peripheral nerve including the epineurium, endoneurium, and proliferation of Schwann cells can be lengthened directly. This method also made it possible to lengthen the nerve stump longitudinally and to control both the rate and distance. We think that this method may be used in the treatment of peripheral nerve injury.

Repair of peripheral nerve defect by direct gradual lengthening of the distal nerve stump in rats: cellular reaction.

Wir untersuchten die Wirkungen von direkten allm&auml;hliche Verl&auml;ngerung des distalen stumpfes eines peripheren Nerven und nachfolgende Nervenregeneration bei Ratten. Ein Segment lange 10 mm wurde von Ratte Ischiasnerv reseziertem. Der distalen Nerven Stumpf war an einem Ring befestigt und direkt mit einer Rate von 1 mm/Tag mit einem urspr&uuml;nglichen externen Nerven Ablenkung Ger&auml;t gezogen. Nach Ablenkung f&uuml;r 10, 15 und 20 Tage, die verl&auml;ngerten Nerven makroskopisch bewertet wurden und Membranunterseite. Am Tag 20, die Mittelwert (SD)-Entfernungen vom Ring 3 mm und 6 mm distale Teil, der mit einer Naht auf den Nerv gekennzeichnet wurden, waren 7 (0,5) mm und 12,1 (0,5) mm, bzw., und die Anzahl der Schwann-Zellen in der immer l&auml;nger werdenden Gruppe stieg um zweimal die der Kontrollgruppe. Der distale Stumpf ein peripherer Nerven einschlie&szlig;lich der Nerv, Endoneurium und Verbreitung von Schwann-Zellen kann direkt verl&auml;ngert werden. Diese Methode machte es auch m&ouml;glich, den Nerven Stumpf l&auml;ngs zu verl&auml;ngern und die Rate und die Distanz zu steuern. Wir denken, dass diese Methode bei der Behandlung von peripheren Nervenverletzung verwendet werden kann.

Reparatur von peripheren Nerven defekt durch direkte schrittweise Verl&auml;ngerung der distalen Nerven Stumpf bei Ratten: Zellul&auml;re Reaktion.

We investigated the use of direct lengthening of the distal stump of a peripheral nerve to compare the results of nerve regeneration using the direct lengthening method with simple end-to-end suture and autografting in rats. A segment 10 mm long was resected from the rat sciatic nerve (n=18 in each group). The distal nerve stump was fixed to a ring and pulled at a rate of 1 mm/day for 20 days using an original external nerve distraction device. The results showed that the degree of nerve regeneration in the lengthened group was superior to that of the grafted group electrophysiologically and histologically, but there were no significant differences between the lengthened and end-to-end suture groups. We conclude that direct lengthening of the distal stump of a peripheral nerve can promote nerve regeneration similar to that observed in a Wallerian degenerated nerve. We think that this technique may be used for the treatment of peripheral nerve injuries.

Repair of peripheral nerve defect by direct gradual lengthening of the distal nerve stump in rats: effect on nerve regeneration.

Wir untersuchten die Verwendung der direkten Verl&auml;ngerung des distalen stumpfes des peripheren Nerven die Ergebnisse der Nervenregeneration mit der direkte Verl&auml;ngerung Methode mit einfachen End-to-End-Naht und Autografting bei Ratten vergleichen. Ein Segment lange 10 mm wurde von der Ratte-Ischiasnerv reseziertem (n = 18 in jeder Gruppe). Der distalen Nerven Stumpf war an einem Ring befestigt und zog mit einer Rate von 1 mm/Tag f&uuml;r 20 Tage mit einem urspr&uuml;nglichen externen Nerven Ablenkung Ger&auml;t. Die Ergebnisse zeigten, dass der Grad der Nervenregeneration in der verl&auml;ngerten Gruppe der Aufgepfropfte Gruppe &uuml;berlegen, electrophysiologically und histologisch war, aber es keine signifikanten Unterschiede zwischen den Gruppen verl&auml;ngert und End-to-End-Naht gab. Wir schlie&szlig;en, dass die direkte Verl&auml;ngerung des distalen stumpfes des peripheren Nerven Nervenregeneration &auml;hnlich wie in Wallersche degenerierte Nerven beobachtet f&ouml;rdern kann. Wir denken, dass diese Technik f&uuml;r die Behandlung von peripheren Nervenverletzungen verwendet werden kann.

Reparatur von peripheren Nerven defekt durch direkte schrittweise Verl&auml;ngerung der distalen Nerven Stumpf bei Ratten: Auswirkungen auf die Nervenregeneration.

The current clinical repair method used for the segmental peripheral nerve defect is autogenous nerve grafting. However, this method has several inherent disadvantages. Therefore, the authors have invented an alternative method for repairing the segmental peripheral nerve defect with a direct gradual lengthening of nerve stumps. In this study, for the clinical application, the authors developed a new external nerve-lengthening device for lengthening peripheral nerve stumps daily without anesthesia.

Repair of the sciatic nerve defect with a direct gradual lengthening of proximal and distal nerve stumps in rabbits.

Die aktuelle klinische Reparaturmethode verwendet den segmentale peripherer Nerven-Mangel ist Autogenes Nerven Pfropfen. Diese Methode hat jedoch einige inh&auml;rente Nachteile. Die Autoren haben daher eine alternative Methode zum Reparieren des segmentale peripherer Nerven-Mangels mit einer direkten schrittweise Verl&auml;ngerung der Nerv St&uuml;mpfe erfunden. In dieser Studie f&uuml;r die klinische Anwendung entwickelten die Autoren ein neues externes Nerven-Verl&auml;ngerung Ger&auml;t f&uuml;r Verl&auml;ngerung peripherer Nerven St&uuml;mpfe t&auml;glich ohne An&auml;sthesie.

Reparatur des Ischiasnerv Mangels mit einer direkten schrittweise Verl&auml;ngerung der proximalen und distalen Nerv St&uuml;mpfe bei Kaninchen.

The objective of this study was to clarify the effect of repetitive compression on nerve physiology in an experimental rabbit model. We defined 80 mmHg as a compression force which caused temporary disturbance of nerve conduction and blood flow with a brief compression. The following compressions were applied for 30 minutes to rabbit sciatic nerves: continuous compression, low frequency release compression (1 second of release time every 30 seconds) and high frequency release compression (1 second of release time every 10 seconds). Compound nerve action potentials and nerve blood flow were evaluated from the start of compression until 30 minutes after release. Endoneurial microvascular permeability was evaluated with Evans Blue albumin. The repetitive compression groups showed delay in recovery of compound nerve action potentials and blood flow after release, with endoneurial oedema. These findings suggest that repetitive compression may increase the risk of breakdown of the blood nerve barrier.

The effects of repetitive compression on nerve conduction and blood flow in the rabbit sciatic nerve.

Das Ziel dieser Studie war, den Effekt der repetitive Kompression auf Nerven Physiologie in einem experimentellen Kaninchen-Modell zu kl&auml;ren. Wir definierten 80 MmHg als Kompression Kraft die vor&uuml;bergehende St&ouml;rung der Nerv Durchlass- und Blut flie&szlig;en mit einer kurzen Komprimierung verursacht. Die folgenden Komprimierungen wurden f&uuml;r 30 Minuten auf Kaninchen Wirbelbruch Nerven angewendet: kontinuierliche Kompression, Niederfrequenz-Freigabe-Komprimierung (1 Sekunde der Release-Zeit alle 30 Sekunden) und hohe Frequenz freizugeben Kompression (1 Sekunde der Release-Zeit alle 10 Sekunden). Zusammengesetzte Nerven Aktionspotentiale und Nerven Blutfluss wurden vom Beginn der Kompression bis 30 Minuten nach Ver&ouml;ffentlichung ausgewertet. Endoneurial mikrovaskul&auml;re Permeabilit&auml;t wurde mit Evans Blue Albumin ausgewertet. Die repetitive Kompression-Gruppen zeigten Verz&ouml;gerung bei R&uuml;ckforderung von zusammengesetzten Nerven Aktionspotentiale und Blutfluss nach Freilassung mit Endoneurial &Ouml;dem. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass repetitive Kompression die Aufschl&uuml;sselung der die Blut-Nerven-Schranke erh&ouml;hen kann.

Die Auswirkungen der sich wiederholenden Komprimierung auf Nervenleitung und Blut flie&szlig;en in die Kaninchen-Ischiasnerv.

Neurons in the central nervous system (CNS) fail to regenerate axons after injuries due to the diminished intrinsic axon growth capacity of mature neurons and the hostile extrinsic environment composed of a milieu of inhibitory factors. Recent studies revealed that targeting a particular group of extracellular inhibitory factors is insufficient to trigger long-distance axon regeneration. Instead of antagonizing the growing list of impediments, tackling a common target that mediates axon growth inhibition offers an alternative strategy to promote axon regeneration. Neuronal growth cone, the machinery that derives axon extension, is the final converging target of most, if not all, growth impediments in the CNS. In this study, we aim to promote axon growth by directly targeting the growth cone. Here we report that pharmacological inhibition or genetic silencing of nonmuscle myosin II (NMII) markedly accelerates axon growth over permissive and nonpermissive substrates, including major CNS inhibitors such as chondroitin sulfate proteoglycans and myelin-associated inhibitors. We find that NMII inhibition leads to the reorganization of both actin and microtubules (MTs) in the growth cone, resulting in MT reorganization that allows rapid axon extension over inhibitory substrates. In addition to enhancing axon extension, we show that local blockade of NMII activity in axons is sufficient to trigger axons to grow across the permissive-inhibitory border. Together, our study proposes NMII and growth cone cytoskeletal components as effective targets for promoting axon regeneration.

Engineering neuronal growth cones to promote axon regeneration over inhibitory molecules.

Neuronen in das Zentralnervensystem (ZNS) nicht Axone nach Verletzungen aufgrund der verminderten systeminterne Axon Wachstumskapazit&auml;t Reife Neuronen zu regenerieren und die feindliche extrinsische Umwelt bestehend aus einem Milieu hemmenden Faktoren. Neuere Studien ergeben, dass Ausrichtung auf eine bestimmte Gruppe von extrazellul&auml;ren hemmenden Faktoren nicht ausreicht, um fern-Axon Regenerierung ausl&ouml;sen. Anstelle davon die wachsende Liste der Hindernisse, bietet die Bek&auml;mpfung eines gemeinsamen Ziels, das Axon Wachstum Hemmung vermittelt eine alternative Strategie zur F&ouml;rderung der Axon Regenerierung. Neuronaler Wachstumskegel, die Maschinerie, die Erweiterung des Axon, abgeleitet wird ist das Endziel der konvergierenden der meisten, wenn nicht alle, Wachstum-Hindernisse im ZNS. In dieser Studie wollen wir Axon Wachstum f&ouml;rdern, indem direkt auf dem Wachstumskegel. Hier berichten wir, dass die pharmakologische Hemmung oder genetische Unterdr&uuml;ckender der actb Myosin II (NMII) deutlich &uuml;ber freiz&uuml;giger und nonpermissive Substrate, einschlie&szlig;lich der gro&szlig;en CNS-Hemmern wie CHONDROITINSULFAT PROTEOGLYKANE und Myelin-assoziiertes Inhibitoren Axon Wachstum beschleunigt. Wir finden, dass NMII Hemmung f&uuml;hrt zu der Neuordnung des Aktin und Mikrotubuli (MTs) in dem Wachstumskegel was zu MT-Reorganisation, der schnelle Axon-Erweiterung &uuml;ber hemmende Substrate zul&auml;sst. Zus&auml;tzlich zu der verbesserten Axon-Erweiterung, wir zeigen, dass lokale Blockade der NMII ist die Aktivit&auml;t im Axone ausreichen, um Trigger Axone &uuml;ber die permissive-hemmenden Grenze wachsen. Zusammen, schl&auml;gt unsere Studie NMII und Wachstum Kegel Zytoskelett Komponenten als wirksame Ziele f&uuml;r Axon Regenerierung zu f&ouml;rdern.

Maschinenbau neuronale Wachstum Zapfen Axon Regenerierung &uuml;ber hemmenden Molek&uuml;le zu f&ouml;rdern.

We investigated the neuropathy induced by leg lengthening histological evaluation using teased nerve fiber specimens and electrophysiological evaluation. Indirect elongation of the sciatic nerve associated with leg lengthening was performed at 1 and 3 mm/day over 30 mm in rats. Electrophysiological evaluation was performed immediately and 60 days after the end of elongation, teased nerve fiber specimens were prepared, and the mean axonal diameter was calculated. The electrophysiological results were more wrong, and the recovery was poorer, in the 3-mm than in the 1-mm group. In the 1-mm group, the nerve conduction velocity (NCV) and the duration of the compound nerve action potential (C-NAP) recovered to a level close to the intact side, but the decrease in the amplitude of the C-NAP persisted. In the teased fiber study, while paranodal demyelination was observed in both groups immediately after elongation, demyelination was decreased in the 1-mm group indicationg recovery compared to the 3-mm group. Paranodal demyelination caused by indirect nerve elongation is considered to have induced electrophysiological disorders. Electrophysiological and morphological damages appeared to be more severe according to elongation speed. The nerve disorder were remained even at 1 mm per day in 60 days.

Functional and morphological effects of indirect gradual elongation of peripheral nerve: electrophysiological and morphological changes at different elongation rates.

Wir untersuchten die Neuropathie vom Bein immer l&auml;nger werdenden histologische Auswertung mit foppte Nerve-Fiber-Exemplare und elektrophysiologischen Evaluierung hervorgerufen. Indirekte Dehnung des Nervus ischiadicus Bein Verl&auml;ngerung zugeordnet wurde bei 1 und 3 mm/Tag &uuml;ber 30 mm bei Ratten durchgef&uuml;hrt. Elektrophysiologischen Evaluierung wurde sofort ausgef&uuml;hrt und 60 Tage nach dem Ende der Dehnung, foppte Nerve-Fiber-Exemplare waren bereit, und der mittlere axonale Durchmesser wurde berechnet. Die elektrophysiologischen Ergebnisse mehr falsch waren, und die Erholung war &auml;rmer, die 3 mm als in der 1-mm-Gruppe. In der 1-mm-Gruppe, die Nerven-Leitgeschwindigkeit (NCV) und die Dauer des Nervus zusammengesetzte Aktionspotential (C-NAP) auf einer Ebene nahe der intakten Seite wiederhergestellt, aber der R&uuml;ckgang in der Amplitude des C-NAP beibehalten. W&auml;hrend paranodalen Demyelinisierung unmittelbar nach Dehnung, in beiden Gruppen beobachtet wurde, war Demyelinisierung in der foppte Faser-Studie bei der 1-mm-Gruppe-Indicationg-Erholung im Vergleich zu der 3-mm-Gruppe sank. Paranodalen Demyelinisierung verursachten indirekten Nerven Dehnung wird als elektrophysiologische Erkrankungen gef&uuml;hrt haben. Elektrophysiologische und morphologische Sch&auml;den zeigte sich schwerere nach Dehnung-Geschwindigkeit. Die Nerven-Erkrankung wurden auch bei 1 mm pro Tag innerhalb von 60 Tagen blieb.

Funktionelle und morphologische Wirkungen der indirekten allm&auml;hliche Dehnung der peripheren Nerven: elektrophysiologische und morphologische Ver&auml;nderungen bei verschiedenen Dehnung Preise.

We have developed a new treatment for peripheral nerve defects: nerve-lengthening method, and confirmed the efficacy and safety of our method using cynomolgus monkeys. A 20-mm defect in the median nerve of monkey's forearms was repaired through the simultaneous lengthening of both nerve stumps with original nerve-lengthening device. To evaluate nerve regeneration after neurorrhaphy, electrophysiological, histological, and functional recovery were examined and compared to the standard autografting. Nerve conduction velocity, axon maturation, and the result of functional test were superior in the nerve-lengthening method than in the autografting. And there were no adverse events associated with our method. We concluded that this method is practical for clinical application.

New treatment for peripheral nerve defects: reconstruction of a 2â€‰cm, monkey median nerve gap by direct lengthening of both nerve stumps.

Wir haben eine neue Behandlung peripherer Nerven M&auml;ngelhaftung entwickelt: Nerv-Verl&auml;ngerung-Methode, und best&auml;tigt die Wirksamkeit und Sicherheit unserer Methode mit Cynomolgus Affen. Ein 20-mm-defekt in der Nervus medianus von Affen Unterarme wurde durch die gleichzeitige Verl&auml;ngerung der beiden St&uuml;mpfe Nerven mit original Nerven-Verl&auml;ngerung Ger&auml;t repariert. Zur Bewertung der Nervenregeneration nach Neurorrhaphy, elektrophysiologische, histologische und funktionelle Wiederherstellung gepr&uuml;ften und im Vergleich zu den standard-Autografting. Nerven-Leitgeschwindigkeit Axon Reifung und das Ergebnis der Funktionspr&uuml;fung waren &uuml;berlegen in der Nerven-Verl&auml;ngerung Methode als in der Autografting. Und es gab keine unerw&uuml;nschten Ereignisse, die unsere Methode zugeordnet. Wir festgestellt, dass diese Methode praktisch f&uuml;r die klinische Anwendung ist.

Neue Behandlung peripherer Nerven M&auml;ngelhaftung: Wiederaufbau von einem 2 cm, Affe-medianus-L&uuml;cke durch direkte Verl&auml;ngerung der beiden St&uuml;mpfe Nerven.

Suppression of glycogen synthase kinase 3 (GSK3) activity in neurons yields pleiotropic outcomes, causing both axon growth promotion and inhibition. Previous studies have suggested that specific GSK3 substrates, such as adenomatous polyposis coli (APC) and collapsin response mediator protein 2 (CRMP2), support axon growth by regulating the stability of axonal microtubules (MTs), but the substrate(s) and mechanisms conveying axon growth inhibition remain elusive. Here we show that CLIP (cytoplasmic linker protein)-associated protein (CLASP), originally identified as a MT plus end-binding protein, displays both plus end-binding and lattice-binding activities in nerve growth cones, and reveal that the two MT-binding activities regulate axon growth in an opposing manner: The lattice-binding activity mediates axon growth inhibition induced by suppression of GSK3 activity via preventing MT protrusion into the growth cone periphery, whereas the plus end-binding property supports axon extension via stabilizing the growing ends of axonal MTs. We propose a model in which CLASP transduces GSK3 activity levels to differentially control axon growth by coordinating the stability and configuration of growth cone MTs.

GSK3 controls axon growth via CLASP-mediated regulation of growth cone microtubules.

Unterdr&uuml;ckung der Glykogen-Synthase Kinase 3 (GSK3) Aktivit&auml;t in Neuronen ergibt pleiotropen Ergebnisse, Axon Wachstumsf&ouml;rderung und Hemmung verursacht. Fr&uuml;here Studien haben vorgeschlagen, dass bestimmte GSK3 Substrate, wie adenomat&ouml;sen Polyposis coli (APC) und collapsin Antwort Mediator Protein 2 (CRMP2), Unterst&uuml;tzung Axon Wachstum durch &Uuml;berwachung der Stabilit&auml;t des axonalen Mikrotubuli (MTs), aber die Substrate(s) und die Mechanismen, die Vermittlung von Axon Wachstum Hemmung weiter ausbleiben. Hier zeigen wir, dass CLIP (zytoplasmatischen Linker Protein)-assoziierten Protein (SPANGE), urspr&uuml;nglich als MT plus -Ende-verbindliches Protein, identifiziert zeigt beide plus-Ende- und Gitter-Bindung-Aktivit&auml;ten im Nerv Wachstum Kegeln und zeigen, dass die beiden MT-Bindung-Aktivit&auml;ten Axon Wachstum in gegnerischen Weise regulieren: die Gitter-Bindung-Aktivit&auml;t vermittelt Axon Wachstum Hemmung induziert durch Unterdr&uuml;ckung der GSK3 Aktivit&auml;t &uuml;ber MT Vorw&ouml;lbung in der Wachstums-Kegel-Peripherie zu verhindern, w&auml;hrend die plus-Ende-Bindungseigenschaft Axon Verl&auml;ngerung &uuml;ber die Stabilisierung der wachsenden Ends der axonalen MTs unterst&uuml;tzt. Wir schlagen ein Modell in dem Verschluss GSK3 Aktivit&auml;tsniveau differentiell Axon Wachstum steuern, koordinieren, die die Stabilit&auml;t und die Konfiguration von Wachstumskegel MTs transduces.

GSK3 steuert Axon Wachstum &uuml;ber Verschluss-vermittelte Regulierung des Wachstums Kegel Mikrotubuli.

Manipulating gene expression in vivo specifically in neurons with precise spatiotemporal control is important to study the function of genes or pathways in the nervous system. Although various transgenic approaches or virus-mediated transfection methods are available, they are time consuming and/or lack precise temporal control. Here we introduce an efficient electroporation approach to transfect adult dorsal root ganglion (DRG) neurons in vivo that enables manipulation of gene expression in an acute and precise manner. We have applied this method to manipulate gene expression in three widely used in vivo models of axon injury and regeneration, including dorsal column transection, dorsal root rhizotomy and peripheral axotomy. By electroporating DRGs with small interfering RNAs against c-jun to specifically deplete c-Jun in adult neurons, we provide evidence for the role of c-Jun in regulation of in vivo axon regeneration. This method will serve as a powerful tool to genetically dissect axon regeneration in vivo.

Genetic dissection of axon regeneration via in vivo electroporation of adult mouse sensory neurons.

Bearbeiten von Genexpression in-vivo speziell in Neuronen mit exakter raumzeitliche Steuerung ist wichtig, die Funktion der Gene oder Wege im Nervensystem zu studieren. Obwohl verschiedene transgene Ans&auml;tze oder Virus-vermittelter Transfectionmethoden verf&uuml;gbar sind, sie sind zeitaufw&auml;ndig und/oder pr&auml;zise zeitliche Steuerung fehlt. Hier stellen wir einen effizienten Elektroporation-Ansatz zur Erwachsenen Dorsal Root Ganglion (DRG) Neuronen in-vivo bioaktiven, der Manipulation der Genexpression in akute und pr&auml;zise Weise erm&ouml;glicht. Wir haben diese Methode zum Bearbeiten von Genexpression in drei weit verbreitete in-vivo-Modelle der Axon Sch&auml;digung und Regeneration, einschlie&szlig;lich dorsalen Spalte Transection, Spinalganglien Rhizotomie und peripheren Axotomie angewandt. Wir bieten das Electroporating DRGs mit kleinen interferierender RNAs gegen c-jun zu c-Jun in Erwachsenen Neuronen speziell zum Abbau Beweise f&uuml;r die Rolle des c-Jun Verordnung der in-vivo Axon Regeneration. Diese Methode dient als ein leistungsf&auml;higes Tool zum Axon Regenerierung in-vivo genetisch zu sezieren.

Die Genetik der Axon Regeneration &uuml;ber in-vivo Electroporation der adulten Maus sensorischen Neuronen.

Axon Wachstum wird durch die Bewegung des einen Wachstumskegel, einer spezialisierten sensorische st&auml;bchenf&ouml;rmiges Struktur befindet sich an der Spitze eines wachsenden Neurit vorangetrieben. Obwohl Retraktion ins Stocken geraten, die Zwiebeln seit langem als Kennzeichen der Regenerierung Fehler anerkannt haben, beginnen Mechanismen, die Bildung und Migration von Nervenenden steuern, nur entwirrt werden. Neuere Studien zeigen auf Mikrotubuli als wichtige Determinanten f&uuml;r Prozesse und Anzeichen daf&uuml;r legt nahe, dass die Regler der Aktin und Microtubule Dynamik in den Wachstumskegel als attraktive Ziele f&uuml;r die Steuerung der Geschwindigkeit und die Flugbahn des regenerierende Axone dienen k&ouml;nnte. Diesen Bericht erl&auml;utert die Potenzial und die j&uuml;ngsten Fortschritte im direkten Modulation der Wachstum Kegel Maschinen als neuartige Strategie Axon Regeneration des Nervensystems nach Verletzungen zu f&ouml;rdern.

W&auml;chst der Wachstumskegel: Umbau des Zytoskeletts Axon Regenerierung zu f&ouml;rdern.

Axon growth is driven by the movement of a growth cone, a specialized sensory motile structure located at the tip of a growing neurite. Although stalled retraction bulbs have long been recognized as hallmarks of regeneration failure, mechanisms that control the formation and migration of nerve endings are only beginning to be unraveled. Recent studies point to microtubules as key determinants for such processes, and emerging evidence suggests that regulators of actin and microtubule dynamics in the growth cone might serve as attractive targets for controlling both the speed and trajectory of regenerating axons. This review discusses the potential of and recent progress in direct modulation of the growth cone machinery as a novel strategy to promote axon regeneration in the nervous system after injury.

Article	Year
Effect of progesterone on recovery from nerve injury during leg lengthening in rats. The Journal of bone and joint surgery. British volume\| PubMed ID: 17613514	2007
Repair of peripheral nerve defect by direct gradual lengthening of the distal nerve stump in rats: cellular reaction. Scandinavian journal of plastic and reconstructive surgery and hand surgery / Nordisk plastikkirurgisk forening [and] Nordisk klubb for handkirurgi\| PubMed ID: 19995246	2009
Repair of peripheral nerve defect by direct gradual lengthening of the distal nerve stump in rats: effect on nerve regeneration. Scandinavian journal of plastic and reconstructive surgery and hand surgery / Nordisk plastikkirurgisk forening [and] Nordisk klubb for handkirurgi\| PubMed ID: 19995247	2009
Repair of the sciatic nerve defect with a direct gradual lengthening of proximal and distal nerve stumps in rabbits. Plastic and reconstructive surgery\| PubMed ID: 20195111	2010
The effects of repetitive compression on nerve conduction and blood flow in the rabbit sciatic nerve. The Journal of hand surgery, European volume\| PubMed ID: 20444785	2010
Engineering neuronal growth cones to promote axon regeneration over inhibitory molecules. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America\| PubMed ID: 21383151	2011
Functional and morphological effects of indirect gradual elongation of peripheral nerve: electrophysiological and morphological changes at different elongation rates. Hand surgery : an international journal devoted to hand and upper limb surgery and related research : journal of the Asia-Pacific Federation of Societies for Surgery of the Hand\| PubMed ID: 21548143	2011
New treatment for peripheral nerve defects: reconstruction of a 2â€‰cm, monkey median nerve gap by direct lengthening of both nerve stumps. Journal of orthopaedic research : official publication of the Orthopaedic Research Society\| PubMed ID: 21671264	2012
GSK3 controls axon growth via CLASP-mediated regulation of growth cone microtubules. Genes & development\| PubMed ID: 21937714	2011
Genetic dissection of axon regeneration via in vivo electroporation of adult mouse sensory neurons. Nature communications\| PubMed ID: 22109517	2011
Growing the growth cone: remodeling the cytoskeleton to promote axon regeneration. Trends in neurosciences\| PubMed ID: 22154154	2012

Saijilafu

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