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Reverse Genetics Mediated Recovery of Infectious Murine Norovirus

Human noroviruses are responsible for most cases of human gastroenteritis (GE) worldwide and are recurrent problem in environments where close ...

Parallel chemical and phylogenetic investigation of a marine cyanobacterium from Panama led to the isolation of two new PKS-NRPS-derived compounds, viridamides A and B. Their structures were determined by NMR and mass spectroscopic methods, and the absolute configurations assigned by Marfey's method and chiral HPLC analysis. In addition to six standard, N-methylated amino and hydroxy acids, these metabolites contained the structurally novel 5-methoxydec-9-ynoic acid moiety and an unusual proline methyl ester terminus. Morphologically, this cyanobacterium was identified as Oscillatoria nigro-viridis, and its 16S rDNA sequence is reported here for the first time. Phylogenetic analysis of these sequence data has identified O. nigro-viridis strain OSC3L to be closely related to two other marine cyanobacterial genera, Trichodesmium and Blennothrix. Viridamide A showed antitrypanosomal activity with an IC50 of 1.1 microM and antileishmanial activity with an IC50 of 1.5 microM.

Viridamides A and B, lipodepsipeptides with antiprotozoal activity from the marine cyanobacterium Oscillatoria nigro-viridis.

Parallele chemische und phylogenetische Untersuchung eine marine Cyanobacterium aus Panama f&uuml;hrte zur Isolierung von zwei neuen PKS-NRP-abgeleitete Verbindungen, Viridamides A und B. Ihre Strukturen wurden durch NMR und Masse spektroskopische Methoden und die absoluten Konfigurationen, die von Marfeys-Methode und chirale HPLC-Analyse zugewiesen bestimmt. Neben sechs standard, N-methyliert amino und hydroxy S&auml;uren enthielt diese Metaboliten der strukturell neuartigen 5-Methoxydec-9-Ynoic-S&auml;ure-Gruppe und eine ungew&ouml;hnliche Prolin Methyl Ester Endstation. Diese Cyanobacterium war morphologisch als Oscillatoria Nigro-Viridis und seiner 16S rDNA Sequenz wird hier zum ersten Mal gemeldet. Phylogenetische Analyse dieser Sequenzdaten hat O. Nigro-Viridis Stamm OSC3L, verwandt mit zwei anderen marinen Cyanobakterien Gattungen Trichodesmium und Blennothrix werden identifiziert. Viridamide A zeigte Antitrypanosomal-Aktivit&auml;t mit einer IC50 1.1 MicroM und Antileishmanial T&auml;tigkeit mit einer IC50 1,5 MicroM.

Viridamides A und B, Lipodepsipeptides mit Antiprotozoal Aktivit&auml;t von der marine Cyanobacterium Oscillatoria Nigro-Viridis.

A new indanone derivative (1) and two new diterpenoids (2 and 3), together with three known flavonoids, have been isolated from an ethanol extract of the leaves of Croton steenkampianus. The structure of 2 was solved by single-crystal X-ray diffraction analysis, whereas those of 1 and 3 were established mainly by 1D and 2D NMR spectroscopic methods. The isolated compounds were tested for their antiplasmodial activity and cytotoxicity. Antiplasmodial assays against chloroquine-susceptible strains (D10 and D6) and the chloroquine-resistant strains (Dd2 and W2) of Plasmodium falciparum showed that compound 2 gave moderate activities at 9.1-15.8 Î¼M, while none of the compounds were cytotoxic against Vero cells.

Bioactive diterpenes and other constituents of Croton steenkampianus.

Ein neues Indanone-Derivat (1) und zwei neue Diterpenoids (2 und 3), zusammen mit drei bekannten Flavonoide, wurden von einem Ethanolextrakt der Bl&auml;tter der Croton Steenkampianus isoliert. Die Struktur der 2 wurde durch Einzel-Kristall R&ouml;ntgenbeugung Analyse, gel&ouml;st, die von 1 und 3 haupts&auml;chlich von 1D und 2D NMR spektroskopische Methoden eingef&uuml;hrt wurden. Die isolierten Verbindungen wurden f&uuml;r ihre Antiplasmodial T&auml;tigkeit und Zytotoxizit&auml;t gepr&uuml;ft. Antiplasmodial Assays gegen Chloroquin-anf&auml;lligen Sorten (D10 und D6) und die Chloroquin-resistente St&auml;mme (Dd2 und W2) von Plasmodium Falciparum zeigte, dass zusammengesetzte 2 moderate Aktivit&auml;ten bei 9.1-15.8 &mu;M, gab, w&auml;hrend keiner der Verbindungen zytotoxisch gegen Vero-Zellen waren.

Bioaktive Diterpene und andere Bestandteile der Croton Steenkampianus.

Cellular proteins play many important roles during the life cycle of all viruses. Specifically, host cell nucleic acid-binding proteins interact with viral components of positive-stranded RNA viruses and regulate viral translation, as well as RNA replication. Here, we report that nucleolin, a ubiquitous multifunctional nucleolar shuttling phosphoprotein, interacts with the Norwalk virus and feline calicivirus (FCV) genomic 3' untranslated regions (UTRs). Nucleolin can also form a complex in vitro with recombinant Norwalk virus NS6 and -7 (NS6/7) and can be copurified with the analogous protein from feline calicivirus (p76 or NS6/7) from infected feline kidney cells. Nucleolin RNA levels or protein were not modified during FCV infection; however, as a consequence of the infection, nucleolin was seen to relocalize from the nucleoli to the nucleoplasm, as well as to the perinuclear area where it colocalizes with the feline calicivirus NS6/7 protein. In addition, antibodies to nucleolin were able to precipitate viral RNA from feline calicivirus-infected cells, indicating a direct or indirect association of nucleolin with the viral RNA during virus replication. Small interfering RNA (siRNA)-mediated knockdown of nucleolin resulted in a reduction of the cytopathic effect and virus yield in CrFK cells. Taken together, these results demonstrate that nucleolin is a nucleolar component that interacts with viral RNA and NS6/7 and is required for feline calicivirus replication.

Nucleolin interacts with the feline calicivirus 3' untranslated region and the protease-polymerase NS6 and NS7 proteins, playing a role in virus replication.

Zellul&auml;re Proteine spielen viele wichtige Rollen w&auml;hrend des Lebenszyklus aller Viren. Insbesondere Host Zelle Nukleins&auml;ure-bindene Proteine interagieren mit viralen Komponenten der positiv-Stranded RNA-Viren und virale &Uuml;bersetzung sowie RNA-Replikation zu regulieren. Hier berichten wir, dass die Nucleolin, eine allgegenw&auml;rtige multifunktionale nukleol&auml;res pendelnden Phosphoprotein, interagiert mit den Norwalk Virus und Feline Calicivirus (FCV) genomischen 3&#39; nicht &uuml;bersetzte Regionen (UTRs). Nucleolin kann auch bilden einen Komplex, der in-vitro mit rekombinantem Norwalkvirus NS6 und-7 (NS6/7) und kann mit dem Analog Protein von feline Calicivirus (p76 oder NS6/7) von infizierten Katze Nierenzellen copurified werden. Nucleolin-RNA-Level oder Protein wurden nicht ge&auml;ndert, w&auml;hrend der FCV-Infektion; jedoch wurde als Folge der Infektion, Nucleolin, relocalize aus der Kernk&ouml;rperchen das Karyoplasma sowie die perinukle&auml;re-Bereich, wo es mit das feline Calicivirus NS6/7 Protein colocalizes, gesehen. Dar&uuml;ber hinaus konnten Antik&ouml;rper gegen Nucleolin viralen RNA aus feline Calicivirus-infizierten Zellen, die angibt, eine direkte oder indirekte Assoziation der Nucleolin mit der viralen RNA w&auml;hrend der Replikation des Virus auszuf&auml;llen. Small interfering RNA (SiRNA)-vermittelten Niederschlag des Nucleolin f&uuml;hrte zu einer Verminderung des zytopathischen Effekt und Virus Ertrags in CrFK Zellen. Zusammengenommen zeigen diese Ergebnisse, dass Nucleolin ein nukleol&auml;res Komponente ist, die interagiert mit viralen RNA und NS6/7 und f&uuml;r feline Calicivirus-Replikation erforderlich.

Nucleolin interagiert mit das feline Calicivirus 3&#39; Untranslatierter Bereich und der Proteine NS6 und NS7 Protease-Polymerase bei der Replikation des Virus eine Rolle spielen.

Article	Year
Viridamides A and B, lipodepsipeptides with antiprotozoal activity from the marine cyanobacterium Oscillatoria nigro-viridis. Journal of natural products\| PubMed ID: 18715036	2008
Bioactive diterpenes and other constituents of Croton steenkampianus. Journal of natural products\| PubMed ID: 18855442	2008
Nucleolin interacts with the feline calicivirus 3' untranslated region and the protease-polymerase NS6 and NS7 proteins, playing a role in virus replication. Journal of virology\| PubMed ID: 21680514	2011

Luis Ureña

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