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Isolation and Genetic Manipulation of Adult Cardiac Myocytes for Confocal Imaging

Cardiac myocytes isolated from adult hearts are widely accepted as a model somewhere half way between embryonic and neonatal muscle cells on one side and ...

cdc25C is a phosphatase which regulates the activity of the mitosis promoting factor cyclin B/cdk1 by dephosphorylation, thus triggering G(2)/M transition. The activity of cdc25C is regulated by phosphorylation which by itself is implicated in regulating the subcellular localization. It is well accepted that cdc25C has to enter the nucleus to activate the cyclin B/cdk1 complex at G(2)/M transition. Here, we will show that cdc25C is located in the cytoplasm at defined dense structures which by immunofluorescence analysis as well as by biochemical subfractionation turned out to be the Golgi apparatus. It will be further shown that cdc25C at the Golgi fraction is an active phosphatase suggesting an additional and new role of cdc25C at the Golgi apparatus.

The mitotic phosphatase cdc25C at the Golgi apparatus.

cdc25C ist eine Phosphatase, die die Aktivit&auml;t der Mitose zur F&ouml;rderung regelt Faktor cyclin B/cdk1 durch Dephosphorylierung, somit Triggerung G (2) / m &Uuml;bergang. Die T&auml;tigkeit des cdc25C wird durch Phosphorylierung reguliert, die selbst darin verwickelt ist, bei der Regulierung der subzellularen Lokalisation. Es wird gut angenommen, dass dieser cdc25C ist den Kern um die cyclin B/cdk1 komplexe bei G (2) / m &Uuml;bergang zu aktivieren. Hier zeigen wir, dass dieses cdc25C befindet sich im Zytoplasma an definierten dichten Strukturen die durch Immunfluoreszenz-Analyse sowie biochemische Subfractionation erwies sich als Golgi-Apparat. Es wird weiter gezeigt werden, dass cdc25C bei der Golgi-Bruch ist eine aktive Phosphatase schl&auml;gt eine zus&auml;tzliche und neue Rolle von cdc25C an den Golgi-Apparat.

Die mitotische Phosphatase-cdc25C am Golgi-Apparat.

The eukaryotic cell cycle is regulated by a network of different protein kinases and phosphatases which are by various mechanisms linked to the growth suppressor p53. Cell cycle regulation is quite similar from yeast to man. Although there is no endogenous p53 in yeast expression of human p53 led to growth arrest of yeast cells which can be suppressed by simultaneous overexpression of cdc25C, a phosphatase regulating entry into mitosis. Herein, we show that overexpression of cdc25C in mammalian cells is insufficient in suppressing a p53 induced growth arrest. We further show that p53 is co-immunoprecipitated with cdc25C and p53 inhibits the cdc25C phosphatase activity in a dose-dependent manner. Thus, our data show that p53 like other binding partners of cdc25C, regulates entry into mitosis by binding to cdc25C.

Interference between p53 and cdc25C in cell cycle regulation.

Der eukaryotischen Zelle Zyklus wird durch ein Netzwerk von verschiedenen Proteinkinasen und Phosphatasen, die durch verschiedene Mechanismen, die mit dem Wachstum Tumorsuppressor p53 verkn&uuml;pft sind. Zellzykluskontrolle ist ziemlich &auml;hnlich aus Hefe, Mann. Zwar es keine endogenen p53 in Hefe Ausdruck der menschlichen p53 f&uuml;hrte zur Verhaftung von Wachstum der Hefezellen, die durch eine simultane &Uuml;berexpression von cdc25C, eine Phosphatase, die Regulierung der Mitoseeintritts unterdr&uuml;ckt werden kann gibt. Hier zeigen wir, dass eine &Uuml;berexpression von cdc25C in S&auml;uger Zellen reicht bei der Unterdr&uuml;ckung einer p53-induzierte Wachstumanhalten. Wir zeigen weiter, dass p53 co-Immunoprecipitated mit cdc25C ist und p53 die cdc25C Phosphatase-Aktivit&auml;t in einer Dosis-abh&auml;ngigen Weise hemmt. Damit unsere Daten zeigen, dass p53 wie andere Bindung-Partner von cdc25C, Mitoseeintritts durch Bindung an cdc25C regelt.

Interferenzen zwischen p53 und cdc25C in Zellzykluskontrolle.

For studying heart pathologies on the cellular level, cultured adult cardiac myocytes represent an important approach. We aimed to explore a novel adult rat ventricular myocyte culture system with minimised dedifferentiation allowing extended experimental manipulation of the cells such as expression of exogenous proteins. Various culture conditions were investigated including medium supplement, substrate coating and electrical pacing for one week. Adult myocytes were probed for (i) viability, (ii) morphology, (iii) frequency dependence of contractions, (iv) Ca(2+) transients, and (v) their tolerance towards adenovirus-mediated expression of the Ca(2+) sensor "inverse pericam". Conventionally, in either serum supplemented or serum-free medium, myocytes dedifferentiated into flat cells within 3 days or cell physiology and morphology were impaired, respectively. In contrast, myocytes cultured in medium supplemented with an insulin-transferrin-selenite mixture on substrates coated with extracellular matrix proteins showed an increased cell attachment and a conserved cross-striation. Moreover, these myocytes displayed optimised preservation of their contractile behaviour and Ca(2+) signalling even under conditions of continuous electrical pacing. Sustained expression of inverse pericam did not alter myocyte function and allowed long lasting high speed Ca(2+) imaging of electrically driven adult myocytes. Our single-cell model thus provides a new advance for high-content screening of these highly specialised cells.

A primary culture system for sustained expression of a calcium sensor in preserved adult rat ventricular myocytes.

F&uuml;r die Untersuchung Herz Pathologien auf zellul&auml;rer Ebene, darstellen kultivierte Erwachsene kardiale Myozyten einen wichtigen Ansatz. Wir wollten eine neuartige Erwachsene Ratte ventrikul&auml;re Muskelfaser-Kultursystem mit minimiertem Entdifferenzierung erm&ouml;glicht erweiterte experimentelle Manipulation von Zellen wie beispielsweise Ausdruck der exogene Proteine zu erkunden. Verschiedenen Kulturbedingungen wurden untersucht, einschlie&szlig;lich mittlere Zuschlag, Substrat-Beschichtung und elektrische Stimulation f&uuml;r eine Woche. Erwachsener Myocytes wurden f&uuml;r Lebensf&auml;higkeit (i), (Ii) Morphologie, (Iii) Frequenz Abh&auml;ngigkeit der Kontraktionen, (iv) Ca(2+) Transienten und (V) ihre Toleranz gegen&uuml;ber Adenovirus-vermittelten Expression von der Ca(2+)-Sensor &quot;inverse Pericam&quot; sondiert. Konventionell, in Serum erg&auml;nzt oder serumfreien Medium, Myocytes entdifferenzierten in flachen Zellen innerhalb von 3 Tagen oder Zelle Physiologie und Morphologie wurden bzw. beeintr&auml;chtigt. Im Gegensatz dazu erg&auml;nzt Myocytes kultiviert im Medium mit einer Insulin-Transferrin-Selenit-Mischung auf Substraten beschichtet mit Proteinen der extrazellul&auml;ren Matrix zeigte eine verst&auml;rkte Zelle-Anlage und einem konservierten Kreuz-Rasterung. Dar&uuml;ber hinaus angezeigt diese Myocytes optimierte Erhaltung ihrer kontraktilen Verhalten und Ca(2+) signalisieren auch unter Bedingungen von kontinuierlichen elektrischen schreiten. Nachhaltig Ausdruck der inverse Pericam Muskelfaser-Funktion nicht ver&auml;ndern und langanhaltendes high-Speed Ca(2+) Bildgebung der elektrisch angetriebene Erwachsener Myocytes erlaubt. Unsere einzellige-Modell bietet somit einen neuen Fortschritt f&uuml;r High-Content Screening dieser hochspezialisierten Zellen.

Prim&auml;rkultur System zur nachhaltigen Ausdruck eines Kalzium-Sensors in erhaltenen Erwachsene Ratte ventrikul&auml;ren Myozyten.

It is well known that for cardiomyocytes, isolation and culturing induce largely unknown remodelling processes. We analysed changes in the structure of cell compartments with optical techniques such as confocal microscopy and fluorescence redistribution after photobleaching employing adenoviral-mediated transduction of targeted fluorescent proteins and small molecule dyes. We identified characteristic remodelling processes: the T-tubular membrane system was gradually lost by a process referred to as "sequential pinching off", in an outward direction. Mitochondria fell in one of three classes, very small (0.9 microm length), medium long (1.8 microm) or extended shape (3.6 microm) organelles. Over the culturing time mitochondria gradually fused. Bleaching of individual mitochondria revealed association between apparently separated mitochondria by "tunnelling" via sub-resolution organelle-tubes. This tunnelling process was increasing over the culturing time. A gradual loss of the cross-striation arrangement in the endoplasmic/sarcoplasmic reticulum was visualised. Analysis of large populations of Ca(2+) sparks by video-rate confocal 2D-scanning revealed significant albeit small changes of these elementary SR-Ca(2+) release events in adult cardiomyocytes that could be related to changes in SR-Ca(2+) content rather than resting Ca(2+) concentration. In conclusion, primary isolated cardiomyocytes from adult hearts undergo a well-defined, but reproducible subcellular remodelling during optimised long term culture.

Remodelling of Ca2+ handling organelles in adult rat ventricular myocytes during long term culture.

Es ist bekannt, dass f&uuml;r Cardiomyocytes, Isolierung und Kultivierung weitgehend unbekannte Filialumbauten Prozesse ausl&ouml;sen. Analysieren wir Ver&auml;nderungen in der Struktur der Zelle Abteile mit optischen Techniken wie konfokale Mikroskopie und Fluoreszenz Umverteilung nach Photobleaching adenoviral-vermittelte Transduktion gezielte fluoreszierende Proteine und niedermolekularer Farbstoffe besch&auml;ftigt. Wir haben charakteristische Filialumbauten Prozesse identifiziert: die T-Membran R&ouml;hrensystem wurde nach und nach verloren, durch einen Prozess, genannt &quot;sequenzielle Kneifen Weg&quot;, nach au&szlig;en. Mitochondrien verliebte sich in eine der drei Klassen, sehr klein (0,9 Microm L&auml;nge), mittellang (1,8 Microm) oder erweiterter Form (3,6 Microm) Organellen. &Uuml;ber die Kultivierung Zeit Mitochondrien allm&auml;hlich verschmolzen. Bleichen von einzelnen Mitochondrien offenbart Assoziation zwischen scheinbar getrennte Mitochondrien durch &quot;Tunneling&quot; &uuml;ber Sub-resolution Organell-Leitungen. Tunnelling dabei war die culturing Zeit erh&ouml;hen. Ein allm&auml;hlicher Verlust der Kreuz-Rasterung Anordnung in den sarcoplasmic/endoplasmic Reticulum visualisiert wurde. Analyse von gro&szlig;en Populationen von Ca(2+) Funken von Video-konfokale 2D-Scan offenbarte erhebliche, wenn auch geringen Tarif&auml;nderungen dieser elementaren SR-Ca(2+) Freigabe-Ereignisse in den Erwachsenen Cardiomyocytes, die auf &Auml;nderungen der SR-Ca(2+) Inhalten anstatt Ruhe Ca(2+) Konzentration bezogen werden konnte. Abschlie&szlig;end werden prim&auml;re isolierte Cardiomyocytes von Erwachsenen Herzen eine klar definierte, aber reproduzierbare subzellulare Umbau w&auml;hrend optimierte langfristige Kultur unterzogen.

Umbau von Ca2 + Handhabung Organellen in den Erwachsenen Ratte ventrikul&auml;re Myocytes w&auml;hrend der langfristigen Kultur.

The major L-type voltage-gated calcium channels in heart consist of an Î±1C (Ca(V)1.2) subunit usually associated with an auxiliary Î² subunit (Ca(V)Î²2). In embryonic cardiomyocytes, both the complete and the cardiac myocyte-specific null mutant of Ca(V)Î²2 resulted in reduction of L-type calcium currents by up to 75%, compromising heart function and causing defective remodeling of intra- and extra-embryonic blood vessels followed by embryonic death. Here we conditionally excised the Ca(V)Î²2 gene (cacnb2) specifically in cardiac myocytes of adult mice (KO). Upon gene deletion, Ca(V)Î²2 protein expression declined by >96% in isolated cardiac myocytes and by >74% in protein fractions from heart. These latter protein fractions include Ca(V)Î²2 proteins expressed in cardiac fibroblasts. Surprisingly, mice did not show any obvious impairment, although cacnb2 excision was not compensated by expression of other Ca(V)Î² proteins or changes of Ca(V)1.2 protein levels. Calcium currents were still dihydropyridine-sensitive, but current density at 0 mV was reduced by <29%. The voltage for half-maximal activation was slightly shifted to more depolarized potentials in KO cardiomyocytes when compared with control cells, but the difference was not significant. In summary, Ca(V)Î²2 appears to be a much stronger modulator of L-type calcium currents in embryonic than in adult cardiomyocytes. Although essential for embryonic survival, Ca(V)Î²2 down-regulation in cardiomyocytes is well tolerated by the adult mice.

Moderate calcium channel dysfunction in adult mice with inducible cardiomyocyte-specific excision of the cacnb2 gene.

Die wichtigen L-Typ-Spannung-Gating Kalzium-Kan&auml;le im Herzen bestehen aus einer &alpha;1C (Ca(V)1.2)-Untereinheit gew&ouml;hnlich verbunden mit einer zus&auml;tzlichen &beta;-Untereinheit (Ca(V)&beta;2). In embryonalen Cardiomyocytes f&uuml;hrte sowohl die vollst&auml;ndige als auch der kardialen Muskelfaser-spezifische null Mutant von Ca (V) &beta;2 Reduktion der L-Typ-Kalzium-Str&ouml;me von bis zu 75 %, Herzfunktion beeintr&auml;chtigen und verursacht fehlerhafte Umbau der Intra- und extra embryonic Blutgef&auml;&szlig;e gefolgt von embryonalen Tod. Hier herausgeschnitten wir bedingt das Ca (V)-&szlig;2-gen (cacnb2) speziell in kardialen Myozyten der Erwachsenen M&auml;usen (KO). Beim gen l&ouml;schen, Ca (V) &beta;2-Proteinexpression sank um &gt; 96 % in isolierten kardialen Myozyten und in &gt; 74 % Protein Fraktionen von Herzen. Diese letztere Protein-Fraktionen enthalten Proteine, Ca (V) die &szlig;2 in kardialen Fibroblasten. &Uuml;berraschenderweise zeigten M&auml;use keiner offensichtliche Beeintr&auml;chtigung, obwohl cacnb2 Exzision durch Ausdruck anderer Ca (V)-&beta;-Proteine oder &Auml;nderungen von Ca (V) 1.2 Protein-Ebene nicht entsch&auml;digt wurden. Kalzium Str&ouml;me waren noch Dihydropyridin-Sensitive, aber Stromdichte bei 0 mV sich um reduzierte &lt; 29 %. Die Spannung f&uuml;r die H&auml;lfte-maximale Aktivierung war leicht verschoben, um mehr ersch&uuml;tterten Potenziale in KO Cardiomyocytes Steuerelement Zellen gegen&uuml;ber, aber der Unterschied war nicht bedeutend. Zusammenfassend l&auml;sst sich sagen, Ca (V) &beta;2 scheint viel st&auml;rker Modulator des L-Typ-Kalzium-Str&ouml;me im embryonalen als in den Erwachsenen Cardiomyocytes. Obwohl zum embryonalen &Uuml;berleben unverzichtbar, ist Ca (V) &beta;2 Herunterregulation in den Cardiomyocytes von den Erwachsenen M&auml;usen gut vertragen.

M&auml;&szlig;ige Kalzium-Kanal-Dysfunktion bei Erwachsenen M&auml;usen mit Induktion Cardiomyocyte-spezifische Exzision des cacnb2-Gens.

QT-Intervall-Bildschirme werden immer wichtiger f&uuml;r kardiale Sicherheit auf alle neuen Medikamente. Bisher Vertrauen Untersuchungen auf Tierversuche oder Zell-basierte Bildschirme hERG-Kan&auml;le in Zelllinien, die ein hohes Ma&szlig; an Automatisierung erm&ouml;glicht ausschlie&szlig;lich Sondierung f&uuml;r Leitwert &Auml;nderungen in heterologously ausgedr&uuml;ckt werden. Erwachsene Cardiomyocytes k&ouml;nnen nicht durch automatisierte Patch-Clamp-Konfigurationen behandelt werden. Daher gilt die optische &Uuml;berpr&uuml;fung der prim&auml;ren isolierten ventrikul&auml;ren Myozyten als Alternative. Mehrere optische Spannungssensoren ratiometrisch Messungen berichtet worden, aber sie alle beeinflusst die naiv-Aktionspotential. Ziel der vorliegenden Studie war zu erforschen die Aufnahmebedingungen und Einstellungen, mit denen optische QT-Intervall-Bildschirme zu definieren.

Optische Aktionspotential Screening auf Erwachsene ventrikul&auml;ren Myozyten als eine alternative QT-Bildschirm.

QT-interval screens are increasingly important for cardiac safety on all new medications. So far, investigations rely on animal experiments or cell-based screens solely probing for conductance alterations in heterologously expressed hERG-channels in cell lines allowing for a high degree of automation. Adult cardiomyocytes can not be handled by automated patch-clamp setups. Therefore optical screening of primary isolated ventricular myocytes is regarded as an alternative. Several optical voltage sensors have been reported for ratiometric measurements, but they all influenced the naÃ¯ve action potential. The aim of the present study was to explore the recording conditions and define settings that allow optical QT-interval screens.

Optical action potential screening on adult ventricular myocytes as an alternative QT-screen.

In cardiac myocytes, cytochalasin D (CytoD) was reported to act as an actin disruptor and mechanical uncoupler. Using confocal and super-resolution STED microscopy, we show that CytoD preserves the actin filament architecture of adult rat ventricular myocytes in culture. Five hundred nanomolar CytoD was the optimal concentration to achieve both preservation of the T-tubular structure during culture periods of 3 days and conservation of major functional characteristics such as action potentials, calcium transients and, importantly, the contractile properties of single myocytes. Therefore, we conclude that the addition of CytoD to the culture of adult cardiac myocytes can indeed be used to generate a solid single-cell model that preserves both morphology and function of freshly isolated cells. Moreover, we reveal a putative link between cytoskeletal and T-tubular remodeling. In the absence of CytoD, we observed a loss of T-tubules that led to significant dyssynchronous Ca(2+)-induced Ca(2+) release (CICR), while in the presence of 0.5 Î¼M CytoD, T-tubules and homogeneous CICR were majorly preserved. Such data suggested a possible link between the actin cytoskeleton, T-tubules and synchronous, reliable excitation-contraction-coupling. Thus, T-tubular re-organization in cell culture sheds some additional light onto similar processes found during many cardiac diseases and might link cytoskeletal alterations to changes in subcellular Ca(2+) signaling revealed under such pathophysiological conditions.

Functional and morphological preservation of adult ventricular myocytes in culture by sub-micromolar cytochalasin D supplement.

Im kardialen Myozyten wurde Cytochalasin D (CytoD) berichtet, als ein Aktin-Disruptor und mechanischen Entkuppler. Konfokale verwenden und superaufl&ouml;sende STED-Mikroskopie, zeigen wir, dass CytoD die Aktin-Filament-Architektur der Erwachsene Ratte ventrikul&auml;ren Myozyten in Kultur bewahrt. F&uuml;nfhundert Nanomolar CytoD war die optimale Konzentration beider Erhaltung der T-tubul&auml;re Struktur w&auml;hrend der Kultur Perioden von 3 Tagen und Erhaltung der wichtigsten funktionellen Eigenschaften wie Aktionspotentiale, Kalzium-Transienten und allem der kontraktilen Eigenschaften der einzelnen Myocytes zu erreichen. Daher schlie&szlig;en wir, dass der Zusatz von CytoD zur Kultur der Erwachsenen kardialen Myozyten tats&auml;chlich verwendet werden kann, ein Volumenmodell einzellige generieren, die Morphologie und Funktion des frisch isolierten Zellen bewahrt. Dar&uuml;ber hinaus zeigen wir einen vermeintlichen Zusammenhang zwischen Zytoskelett und T-tubul&auml;re Umbau. Ohne CytoD, wir beobachteten einen Verlust von T-Tubuli, die zu erheblichen Dyssynchronous Ca(2+) Ca(2+)-induzierte Freisetzung (CICR), in Gegenwart von 0,5 &mu;M gef&uuml;hrt CytoD, T-Tubuli und homogene CICR majorly beibehalten wurden. Solche Daten vorgeschlagen, einen m&ouml;glichen Zusammenhang zwischen der Aktin-Zytoskeletts, T-Tubuli und synchrone, zuverl&auml;ssige Erregung-Kontraktion-Kopplung. Also T-Pellets Reorganisation in der Zellkultur zus&auml;tzliche beleuchtet auf &auml;hnliche Prozesse bei vielen Herzerkrankungen gefunden und Zytoskelett &Auml;nderungen mit &Auml;nderungen in subzellul&auml;ren Ca(2+) Signalisierung offenbart unter pathophysiologischen Bedingungen verkn&uuml;pfen.

Funktionelle und morphologische Erhaltung der Erwachsenen ventrikul&auml;ren Myozyten in der Kultur von Sub-micromolar Cytochalasin D erg&auml;nzen.

Coordinated release of calcium (Ca(2+) ) from the sarcoplasmic reticulum (SR) through cardiac ryanodine receptor (RYR2) channels is essential for cardiomyocyte function. In catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia (CPVT), an inherited disease characterized by stress-induced ventricular arrhythmias in young patients with structurally normal hearts, autosomal dominant mutations in RYR2 or recessive mutations in calsequestrin lead to aberrant diastolic Ca(2+) release from the SR causing arrhythmogenic delayed after depolarizations (DADs). Here, we report the generation of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from a CPVT patient carrying a novel RYR2 S406L mutation. In patient iPSC-derived cardiomyocytes, catecholaminergic stress led to elevated diastolic Ca(2+) concentrations, a reduced SR Ca(2+) content and an increased susceptibility to DADs and arrhythmia as compared to control myocytes. This was due to increased frequency and duration of elementary Ca(2+) release events (Ca(2+) sparks). Dantrolene, a drug effective on malignant hyperthermia, restored normal Ca(2+) spark properties and rescued the arrhythmogenic phenotype. This suggests defective inter-domain interactions within the RYR2 channel as the pathomechanism of the S406L mutation. Our work provides a new in vitro model to study the pathogenesis of human cardiac arrhythmias and develop novel therapies for CPVT.

Dantrolene rescues arrhythmogenic RYR2 defect in a patient-specific stem cell model of catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia.

Koordinierten Freisetzung von Kalzium (Ca(2+)) aus dem sarkoplasmatischen Retikulum (SR) durch kardiale Ryanodin-Rezeptor (RYR2)-Kan&auml;le ist essentiell f&uuml;r Cardiomyocyte-Funktion. In Catecholaminergic polymorphe ventrikul&auml;ren Tachykardie (CPVT), eine vererbte Krankheit, charakterisiert durch Stress-induced ventrikul&auml;re Arrhythmien bei jungen Patienten mit strukturell normalen Herzen, f&uuml;hren autosomal dominante Mutationen im RYR2 oder rezessive Mutationen im Calsequestrin zu abweichenden diastolische Ca(2+) Entlassung aus der SR verursacht Arrhythmogenic verz&ouml;gert nach Depolarizations (V&auml;ter). Hier berichten wir die Generation der induzierten pluripotenten Stammzellen (iPSCs) aus einem CPVT Patienten tragen eine neuartige RYR2-S406L-Mutation. Patienten iPSC abgeleiteten Cardiomyocytes f&uuml;hrte Catecholaminergic Stress und erh&ouml;hten diastolischen Ca(2+) Konzentrationen, eine reduzierte SR Ca(2+) Inhalt und eine erh&ouml;hte Anf&auml;lligkeit f&uuml;r V&auml;ter und Arrhythmie im Vergleich zur Kontrolle Myocytes. Dies ist auf erh&ouml;hte H&auml;ufigkeit und Dauer der elementaren Ca(2+) Freigabe Ereignisse (Ca(2+) Funken). Dantrolen, eine Droge, die effektiv auf Maligne Hyperthermie, normale Ca(2+) Funken Eigenschaften wiederhergestellt und der arrhythmogenen Ph&auml;notyp gerettet. Dies schl&auml;gt defekte Inter Wechselwirkungen innerhalb der RYR2-Kanal als die Pathomechanism der S406L-Mutation. Unsere Arbeit stellt ein neues in-vitro-Modell zum Studium der Pathogenese des menschlichen Herzrhythmusst&ouml;rungen und neuartige Therapien f&uuml;r CPVT entwickeln.

Dantrolen rettet Arrhythmogenic RYR2 Defekt in einem Patienten-spezifischen Stammzell-Modell der Catecholaminergic polymorphe ventrikul&auml;re Tachykardie.

Article	Year
The mitotic phosphatase cdc25C at the Golgi apparatus. Biochemical and biophysical research communications\| PubMed ID: 17097061	2006
Interference between p53 and cdc25C in cell cycle regulation. International journal of oncology\| PubMed ID: 17611691	2007
A primary culture system for sustained expression of a calcium sensor in preserved adult rat ventricular myocytes. Cell calcium\| PubMed ID: 17822759	2008
Remodelling of Ca2+ handling organelles in adult rat ventricular myocytes during long term culture. Journal of molecular and cellular cardiology\| PubMed ID: 20540947	2010
Moderate calcium channel dysfunction in adult mice with inducible cardiomyocyte-specific excision of the cacnb2 gene. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 21357697	2011
Optical action potential screening on adult ventricular myocytes as an alternative QT-screen. Cellular physiology and biochemistry : international journal of experimental cellular physiology, biochemistry, and pharmacology\| PubMed ID: 21471717	2011
Functional and morphological preservation of adult ventricular myocytes in culture by sub-micromolar cytochalasin D supplement. Journal of molecular and cellular cardiology\| PubMed ID: 21930133	2012
Dantrolene rescues arrhythmogenic RYR2 defect in a patient-specific stem cell model of catecholaminergic polymorphic ventricular tachycardia. EMBO molecular medicine\| PubMed ID: 22174035	2011

Sandra Ruppenthal

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